细胞生物学试剂

NucView 488双功能细胞凋亡试剂盒

基本信息
产品名称:
NucView 488双功能细胞凋亡试剂盒
英文名称:
DEVD-NucView 488 Caspase-3
国产/进口:
进口
产地/品牌:
美国Biotium
型号:
30029
参考报价:
总点击数:
12150
更新日期:
2020-08-07
产品类别:

性能参数

NucView 488

双功能荧光底物实现活细胞 Caspase-3 活性检测并同时染色细胞核DNA
 

特点:

  • 在活细胞中检测Caspase-3并染色细胞核DNA
  • 直接加入细胞培液,孵育15-30分钟后即可检测,无需清洗残余染料
  • 兼容使用荧光素滤光片的流式细胞仪和荧光显微镜。
  • 可固定染色

DEVD-NucView 488 Caspase-3 底物是Biotium公司开发的一系列在活细胞内实时检测Caspase活性的NucView Caspase 底物中的第一个产品。不同于传统的caspase酶检测方法,Biotium 公司发明了一种创新的荧光底物设计技术,将底物的一部分连接到功能性染料上,从而使这些染料失去功能。利用这种方法设计的荧光底物在酶切之后,染料能被释放出来恢复功能并能结合目标分子释放荧光(图2)。
对于DEVD-NucView 488 Caspase-3底物,Biotium 将一段带有大量负电荷的DEVD肽连接到一种和DNA结合的染料上。这些负电荷使得该染料不能结合DNA,也就不能产生荧光(图6)。这种底物可以快速的穿过细胞膜进入细胞质并在这里被Caspase-3剪切,从而释放出和DNA有高亲和力的染料。释放出来的染料可以迁移进入细胞核并把细胞核染成亮绿色(图1)。因此,这种双功能底物让研究人员在凋亡细胞内检测Caspase-3活性的同时染色细胞核,显示细胞核在凋亡过程中经历的形态学变化。在众多凋亡的细胞内,不同细胞可能处在不同时期并经历着凋亡过程中的不同事件,因而研究中很


图3.凋亡的Jurkat细胞顺序用sulforhodamine 101-annexin V(Texas RedTM- annexin V)(#29002)和DEVD-NucView 488 Caspase-3底物各孵育15分钟。annexin V染色的磷酸化丝氨酸(PS)在细胞表面成红色,而底物被Caspase-3剪切释放的DNA染料将细胞核染为绿色。

重要的一点就是能实时独立的跟踪这些事件,从而更好的了解事件之间的相互关系。DEVD-NucView 488 Caspase-3底物结合Biotium公司开发的其他荧光探针,是通过荧光显微镜和/或者流式细胞仪来研究这些不同事件的时间、空间关系的强有力工具(图4)。

图2. 模式图显示了NucView 荧光底物检测细胞内Caspase活性的原理。

Biotium公司现提供两种活细胞Caspase-3检测试剂盒。产品#30029包含DEVD-NucView 488 Caspase-3底物和Caspase-3抑制剂,足够在流式细胞仪或荧光显微镜上进行至少100次实验。产品#30030是一种双凋亡检测方法试剂盒,包含DEVD-NucView 488 Caspase-3底物和用来检测磷酸化丝氨酸(PS)转位的红色荧光sulforhodamine 101-annexin V,足够在流式细胞仪或荧光显微镜上进行至少50次实验。使用两种产品的具体实验步骤可以从Biotium网站上下载。

 
图4. 在Staurosporine诱导不同凋亡时间(分别为1小时,2.5小时和5小时)后,使用DEVD-NucView 488 Caspase-3底物孵育Jurkat细胞,并用流式细胞仪检测Jurkat细胞Caspase-3活性。每次分析前,用DEVD-NucView 488 Caspase-3底物(10μM)孵育诱导后的细胞15分钟。在0时刻(未用Staurosporine诱导作为对照)Caspase-3阳性细胞百分比为0%(红色),1小时为10%(蓝色),2.5小时为80%(紫色),5小时为97%(天蓝色)。   图5. Staurosporine诱导的Hela细胞在37℃下用1μM的DEVD-NucView 488 Caspase-3底物孵育30分钟后用通常的3.7%甲醛固定。固定后的细胞破膜并用sulforhodamine 101-phalloidin(Texas Red-phalloidin)(#00033)染色。调亡细胞的细胞核DNA被酶反应释放的染料染成绿色,同时所有细胞被F-actin结合的phalloidin染成红色。

 


图6. 用稀释在pH7.4 TE缓冲溶液中的dsDNA滴定NucView 488 Caspase-3底物(1μM)和它的酶切产物(1μM)。用荧光酶标仪监测530nm荧光信号(475nm激发)。
Table 1. NucView Caspase 检测产品
Cat#
Product Name
Unit Size Unit Price 品 牌
30067
50 assays
¥3822
Biotium
70055
20 X 50ug
¥1764
Biotium
70054
20X50ug
¥1764
Biotium
30062
100 assays
¥3822
Biotium
30029
100 assays
¥3822
Biotium
10403
100 uL
¥3493
Biotium
10402
100 uL
¥3493
Biotium
30030
50 assays
¥3822
Biotium
** 一次购买5个包装以上可获得更优惠价格,立刻拨打我们的订购电话。

 

 

Cat#
Product Name
Unit Size
Unit Price
品 牌
30067
50 assays
¥3822
Biotium
70055
20 X 50ug
¥1764
Biotium
70054
20X50ug
¥1764
Biotium
30062
100 assays
¥3822
Biotium
30029
100 assays
¥3822
Biotium
10403
100 uL
¥3493
Biotium
10402
100 uL
¥3493
Biotium
30030
50 assays
¥3822
Biotium

   主要用于:

检测线粒体膜电位变化的指示染料JC-1

活细胞凋亡检测  双染法CF染料标记的 Annexin V /PI偶联物

CF染料标记的TUNEL试剂盒

细胞活性与增殖检测试剂盒

活/死细胞定量分析试剂盒

 

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电话:010-62564426 62564427
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上海开放生物科技有限公司,前身上海开放科技发展有限公司,公司成立于1994年,由于公司经营业务的持续增长和扩大,2009年从上海开放科技发展有限公司剥离,成立上海开放生物科技有限公司。专门从事于生物化学试剂研发和销售,产品被广泛用于分子生物学、细胞生物学、遗传学、神经科学、新药研发与筛选,以及医疗卫生等生命科学领域。我们在致力于生物化学试剂产品研发的同时,还与著名的荧光试剂产品供应商美国Biotium公司建立了长期的合作关系,并成为美国Biotium官方授权中国总代理商。

     我司在中国市场代理Biotium品牌已近20年,自美国Biotium公司创立初期至今,一直与其保持良好的合作关系。我们的产品销售面向全国。主营美国Biotium原装进口GelRed、EvaGreen(BioRad、Qiagen)、CF染料(替代AF系列、Cy系列等),新一代核酸和抗体标记染料,HRM技术、细胞凋亡检测等。我们为用户提供一流的技术服务,在北京设立分支机构的同时,为了推广Biotium品牌的产品,我们还在全国各地发展了多家产品分销商。 多年来,本公司已形成了一支经验丰富的销售服务与技术支持专业队伍,您的满意是我们的宗旨,您的信任是我们的动力,我们真诚地期待着与您的沟通与合作。


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