简介：
内切木聚糖酶（内切-1,4-β-木聚糖酶，EC 3.2.1.8）是一种负责木聚糖水解降解的酶，木聚糖是一个天然多糖家族，其结构包括一条由4-O-甲基-D-葡萄糖醛酸、D-葡萄糖醛酸或L-阿拉伯呋喃糖残基修饰的β-1,4-连接的D-吡喃木糖基残基主链。内切木聚糖酶负责水解连接主链中存在的吡喃木糖基残基的β-1,4糖苷键。这种酶在商业上很重要，在各个行业都有应用。它在饲料工业中用于分解谷物中的阿拉伯木聚糖，从而提高谷物基饲料对鸡和猪的消化率，以及反刍动物饲料的营养质量和消化率。此外，木聚糖酶广泛应用于烘焙、造纸和纸浆、洗涤剂和生物燃料行业，最近它们已被应用于生产低聚木糖（XOS）和阿拉伯低聚木糖（AXOS），用作人类营养中的益生元。有许多方法可用于测量内切-β-木聚糖酶，包括基于商业上可用的天然多糖（如山毛榉木木聚糖（P-XYLNBE）和小麦阿拉伯木聚糖（P-GAXYM）水解还原糖水平增加的方法。关于这种方法，McCleary和McGeough最近证明，常用的DNS方法严重高估了内切木聚糖酶的活性，如果进行还原糖测定，必须采用Nelson-Somogyi方法。染色的可溶性或不溶性（交联）阿拉伯木聚糖（S-AWAXP、S-AWAXL、I-AZWAX、T-XAX）也可用于方便地测量内切木聚糖酶，但由于需要过滤/离心步骤，这些检测形式不太适合自动化。
XylX6底物与常用的比色寡糖底物相比具有明显的优势，因为非还原性末端残基上的酮亚丁基缩醛充当“阻断基团”，防止外显酶（包括通常出现在粗样品提取物中的b-木糖苷酶和b-葡萄糖苷酶）水解。该试剂可在高达50℃的温度和4-7.5的pH范围内使用。
套件：
K-XylX6-2V适用于手动格式的200次测定或自动分析仪格式的400次测定。
瓶子1：（x2）
XylX6试剂：冻干粉末，含有XylX6-底物和b-木糖苷酶。在-10ºC以下稳定4年以上。
瓶子2：
木霉菌内切-1,4-β-木聚糖酶标准溶液（5 mL，~2.86 U/mL；实际值在小瓶标签上注明），溶于50%甘油水溶液和叠氮化钠（0.02%w/v）中。稳定时间>4年；在-10°C以下密封储存。
试剂溶液的制备：
1.向瓶I（XylX6试剂）中的冻干粉末中加入5.0 mL去离子水。为了最大限度地提高该试剂的长期稳定性，应将该溶液等分到适当大小的小瓶中，并在-10℃以下储存。这有助于最大限度地减少冻融循环。在室温下稳定48小时。
2.用正排量移液管，将0.5 mL瓶2的内容物分配到9.5 mL缓冲液D中，并充分混合。不使用时，请在-10ºC以下储存。一旦稀释，标准品在-10℃以下至少稳定6个月。
概要：
用于测定内切木聚糖酶（内切-1,4-β-木聚糖酶）的XylX6测定试剂含有两种成分；1）4,6-O-（3-酮丁基）-4-硝基苯基-β-D-45-葡萄糖基-木五糖苷和2）β-木糖苷酶。酮阻断基团可防止β-木糖苷酶或其他外显作用糖苷酶对XylX6底物的任何水解作用。与内切木聚糖酶一起孵育会产生一种非封闭的比色低聚糖，该低聚糖可被辅助的β-木糖苷酶快速水解。因此，4-硝基苯酚的形成速率与木聚糖酶水解XylX6直接相关。反应终止，加入Tris缓冲溶液（pH=10.0）后出现酚盐颜色。
规格：200次测定（手动）/400次测定（自动分析仪）
运输温度：环境温度
储存温度：短期稳定性：2-8°C，
长期稳定性：见单个组件标签
稳定性：在推荐的储存条件下>2年
分析物：内切-1,4-β-木聚糖酶
分析格式：分光光度计、自动分析仪
检测方法：吸光度
波长（nm）：400，
                      405
信号响应：增加
检测限：5.3 x 10-4U/mL
再现性（%）：~3%
总检测时间：10分钟
应用实例：发酵液、工业酶制剂、动物饲料、生物燃料研究、大麦芽分析。
方法识别：新方法