简介：
谷物豆类是人类和牲畜饮食的重要组成部分。半乳糖基蔗糖低聚糖（棉子糖、水苏糖和马鞭草糖）是许多食用豆类的主要成分，谷物豆类的抗营养活性通常与这些低聚糖的存在有关。然而，最近的数据表明，益生元具有有益的作用。棉子糖通常是大多数豆类种子中存在的主要半乳糖基蔗糖低聚糖。它也是甜菜糖蜜中的重要成分。
几种溶剂可用于从碾磨的豆类种子中提取半乳糖基蔗糖低聚糖。这些通常是水/醇混合物。在提取之前或同时，必须灭活内源性α-半乳糖苷酶和转化酶。这可以通过在提取面粉之前将研磨材料样品在乙醇或乙醇水溶液混合物中回流来实现。
原理：
棉子糖被α-半乳糖苷酶（α-GAL）水解为D-半乳糖和蔗糖（1）。α-GAL还水解其他α-半乳糖苷，如水苏糖、马鞭草糖和半乳糖醇[1-O-（α-D-半乳糖基）-肌醇]（如果存在）。这种酶不会像乳糖那样切割β-连接的半乳糖。
                                                （α-半乳糖苷酶）
（1） 棉子糖+水苏糖+抗坏血酸+H₂O——> D-半乳糖+蔗糖
半乳糖变位酶（GalM）催化D-半乳糖α-和β-异头物形式的相互转化（2）。
                       （GalM）
（2） α-D半乳糖——>β-D-半乳糖
在pH 8.6（3）的条件下，β-半乳糖脱氢酶（β-GalDH）存在下，β-D-半乳糖被NAD⁺氧化为D-半乳糖酸。
                                 （β-GalDH）
（3） β-D-半乳糖+NAD⁺——>D-半乳糖酸+NADH+H⁺
在该反应中形成的NADH的量与释放的D-半乳糖的量是化学计量的。NADH是通过340nm处吸光度的增加来测量的。
将棉子糖测量为释放的D-半乳糖是通过α-半乳糖苷酶和β-果糖酶的作用释放的D-葡萄糖测量的替代方法[见“棉子糖/蔗糖/D-葡萄糖检测试剂盒”（K-RAFGL）]。每种程序都有优点和局限性。
套件：
可进行120次检测的试剂盒。试剂盒包含完整的检测方法以及：
瓶1：含有叠氮化钠（0.02%w/v）作为防腐剂的缓冲液（25 mL，pH 8.6）。
在4°C下稳定2年以上。
瓶2: NAD⁺。在-10°C以下稳定5年以上。
瓶3: D-半乳糖脱氢酶加半乳糖变位酶悬浮液（2.5 mL）。在4°C下稳定2年以上。
瓶4：α-半乳糖苷酶（pH 4.6），冻干粉。在-10°C以下稳定4年以上。
瓶5：0.02%（w/v）叠氮化钠中的半乳糖标准溶液（5 mL，0.4 mg/mL）。
稳定2年以上；在4°C下密封储存。
瓶6：棉子糖对照粉（甘露醇中棉子糖含量约为4%w/w；准确浓度在瓶标签上注明）。稳定>5年；在室温下密封储存。
试剂溶液/悬浮液的制备：
1.使用随附的瓶子1中的内容物。在4°C下稳定2年以上。
2.将瓶子2的内容物溶解在12.2毫升蒸馏水中。
在4°C下稳定约4周，或在-10°C以下稳定>2年（为避免重复的冻融循环，分为适当大小的等分试样并储存在聚丙烯管中）。
3.使用提供的瓶子3中的内容物。在第一次打开之前，摇晃瓶子以去除可能沉积在橡胶塞上的任何蛋白质。随后，将瓶子垂直存放。
在4°C下稳定2年以上。
4.用12毫升蒸馏水溶解瓶子4的内容物。分成约3 mL的等分试样。使用之间在聚丙烯管中储存在-10°C以下，使用时在冰上储存。在-10°C以下稳定2年以上。
5.使用提供的瓶子5中的内容物。稳定2年以上；在4°C下密封储存。
6.准确称取0.500 g瓶6的内容物，放入25 mL容量瓶中。用蒸馏水调整到标记处，并将内容物充分混合。分成10毫升等分，储存在-10°C以下。在-10°C以下稳定2年以上。
概要：
规格：每个试剂盒120次测定
运输温度：环境温度
稳定性：在推荐的储存条件下>2年
分析物：D-半乳糖、棉子糖
检测形式：分光光度计
检测方法：吸光度
波长（nm）：340
信号响应：增加
线性范围：每次测定4至83µg D-半乳糖（即每次测定约12至250µg棉子糖）
检测限：21mg/L
反应时间（分钟）：~60分钟
应用实例：谷物粉、大豆粉、蔗糖生产副产品等材料。
方法识别：在食品分析中使用和接受
棉子糖/D-半乳糖检测试剂盒允许对植物材料和食品中的棉子糖和D-半乳糖进行特异性和快速的测量。
内容说明：如果所有体积减半，使用MegaQuant^TM波分光光度计（D-MQWAVE）可使手动测试次数加倍。