总淀粉HK检测试剂盒，K-TSHK--性能参数，报价/价格，图片

基本信息

产品名称：

总淀粉HK检测试剂盒，K-TSHK

英文名称：

Total Starch HK Assay Kit

国产/进口：

进口

产地/品牌：

爱尔兰/Megazyme

型号：

100次

参考报价：

优惠

销售商：

上海意果科技有限公司

总点击数：

6531

更新日期：

2025-10-20

产品类别：

食品检测试剂

性能参数

概要：
规格：每个试剂盒100次检测
运输温度：环境温度
稳定性：在推荐的储存条件下>2年
分析物：总淀粉
检测形式：分光光度计
检测方法：吸光度
波长（nm）：340
信号响应：增加
线性范围：每次测定4至80µg D-葡萄糖
检测限：1 g/100 g
总检测时间：~90分钟
应用示例：谷物粉、食品和其他材料。
总淀粉HK（己糖激酶）测定试剂盒，用于测定谷物粉和食品中的总淀粉。
该检测试剂盒包含一种改进的α-淀粉酶，可以在pH 5.0（以及pH 7.0）下进行淀粉酶培养。通过将D-葡萄糖测定调整为基于己糖激酶/葡萄糖-6-磷酸脱氢酶/NADP+的形式，对该方法进行了进一步修改。
引言：
淀粉测定方法大致可分为酸水解法或酶解法。酸水解法仅适用于纯淀粉样品，因此应用有限。酶解法在预处理步骤、淀粉糊化、液化和糊精化、糊精水解为葡萄糖以及葡萄糖测量等方面存在差异。 AACC 方法 76-11 规定在高压灭菌器的水性条件下进行淀粉糊化，随后用糖化酶将淀粉转化为葡萄糖并进行葡萄糖测量。AACC 方法 76-11 会低估一系列样品和材料中的淀粉含量，包括高直链玉米淀粉和许多加工谷物产品。如今，大多数使用的方法在淀粉糊化步骤期间或之后立即采用耐热 α- 淀粉酶处理。对于难以糊化的样品（如高直链玉米淀粉），已采用氢氧化钠或二甲基亚砜（DMSO）等溶剂。在膳食纤维测定中确保淀粉完全溶解的程序中，Englyst 和 Cummings（1988）纳入了用淀粉脱支酶（普鲁兰酶）处理的步骤。
为了满足对一种极其简单、但定量且可靠的总淀粉测量程序的需求，Megazyme 生产并提供了一种基于使用耐热 α- 淀粉酶和糖化酶的总淀粉测定试剂盒（McCleary 等人）。该方法已被 AOAC（官方方法 996.11）和 AACC（方法 76.13.01）采用。

关于耐热 α- 淀粉酶的处理。含有高水平抗性淀粉的样品（如高直链玉米淀粉）需预先在冷的 2M 氢氧化钾中溶解，而富含 D - 葡萄糖和麦芽糊精的样品则需在分析前用乙醇水溶液洗涤。对于仅含可溶性淀粉或麦芽糊精的样品，无需使用耐热 α- 淀粉酶进行煮沸处理。Megazyme 总淀粉分析程序（K-TSHK）可用于测定大多数谷物产品（天然或加工品）中的总淀粉含量。对于大多数样品（如小麦粉），在耐热 α- 淀粉酶存在下，将样品在约 100℃下孵育即可完全溶解淀粉。

原理：
耐热 α- 淀粉酶将淀粉水解为可溶性支链和直链麦芽糊精（1）。
（耐热 α- 淀粉酶，pH 5.0，100°C）

（1）淀粉颗粒 + 水 → 麦芽糊精
必要时，样品中的抗性淀粉需先在约 4°C 下用 2 M 氢氧化钾溶液搅拌溶解，随后用乙酸钠缓冲液中和并经 α- 淀粉酶水解（2）。
（氢氧化钾溶解后中和 + α- 淀粉酶）

（2）抗性淀粉 + 水 → 麦芽糊精
糖化酶（AMG）将麦芽糊精定量水解为 D - 葡萄糖（3）。
（糖化酶）
（3）麦芽糊精 + 水 → D - 葡萄糖
D - 葡萄糖在己糖激酶（HK）作用下被三磷酸腺苷（ATP）磷酸化为葡萄糖 - 6 - 磷酸（G-6-P），同时生成二磷酸腺苷（ADP）（1）。
（己糖激酶）

（4）D - 葡萄糖 + 三磷酸腺苷（ATP） → 葡萄糖 - 6 - 磷酸（G-6-P） + 二磷酸腺苷（ADP）
在葡萄糖 - 6 - 磷酸脱氢酶（G6P-DH）存在下，G-6-P 被烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADP⁺）氧化为 6 - 磷酸葡萄糖酸，并生成还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH）（2）。
（葡萄糖 - 6 - 磷酸脱氢酶）

（5）G-6-P + 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADP⁺） → 6 - 磷酸葡萄糖酸 + 还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH） + 氢离子（H⁺）
反应中生成的 NADPH 与 D - 葡萄糖的量呈化学计量关系，通过测量 340 nm 处吸光度的增加量即可确定 NADPH 的含量。

试剂盒：
Megazyme 提供适用于进行 100 次检测的试剂盒。试剂盒包含完整的检测方法及以下组分：

瓶 1：耐热 α- 淀粉酶（12 mL，以可溶性淀粉计为 8,300 U/mL，或以 Ceralpha 试剂计为 3,000 U/mL）[12]，pH 5.0、40°C 条件下适用。
储存条件：4°C 下稳定 > 3 年。

瓶 2：糖化酶（10 mL，以可溶性淀粉计为 3,300 U/mL，或以对硝基苯基 -β- 麦芽糖苷计为 200 U/mL）[13]，pH 4.5、40°C 条件下适用。
储存条件：4°C 下稳定 > 3 年。

瓶 3：缓冲液（15 mL，pH 7.6）含叠氮化钠（0.02% w/v，作为防腐剂）。储存条件：4°C 下稳定 > 3 年。

瓶 4：NADP⁺+ATP。储存条件：4°C 下稳定 > 2 年。

瓶 5：己糖激酶 + 葡萄糖 - 6 - 磷酸脱氢酶悬液（2.25 mL）。储存条件：-10°C 以下稳定 > 5 年。

瓶 6：D - 葡萄糖标准溶液（5 mL，1.0 mg/mL）。储存条件：4°C 下稳定 > 2 年。

瓶 7：标准化普通玉米淀粉对照品。储存条件：室温密封储存，稳定 > 5 年。

试剂溶液 / 悬浮液的制备：

1.用试剂 1（100 mM 乙酸钠缓冲液，pH 5.0；未提供）将瓶 1 内容物 1.0 mL 稀释至 30 mL。稀释后的酶需冷冻保存，使用期间尽可能保持低温。
2.瓶 2 内容物直接使用。该溶液在 - 10°C 以下可稳定保存 > 3 年。使用期间建议分装为合适体积的等分试样，存放于聚丙烯管中，-10°C 以下保存，并在使用间隙保持冷却。
3.瓶 3 内容物直接使用。在 4°C 下可稳定保存 > 2 年。
5.0 mL Combitip®（用于分装 0.1 mL 等分试样）。由于液体黏稠，建议使用正位移分配器（如带 Combitip® 的 Eppendorf Multipette®）进行分装。
4.将瓶子4的内容物溶解在12毫升蒸馏水中。在4°C下稳定约4周或稳定>2年低于-10°C（为避免重复的冻融循环，请分开分成适当大小的等分试样，储存在聚丙烯中管）。
5.使用提供的瓶子5中的内容物。在第一次打开之前，摇动瓶子以去除可能沉积在橡胶塞上的任何酶。随后，将瓶子垂直存放。使用前，将瓶子旋转以混合内容物。
6.使用随附的瓶子6中的内容物。稳定>5年；在室温下密封储存。
7.使用提供的瓶子7中的内容物。稳定>5年；在室温下密封储存。

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