L-苹果酸检测（手动格式）,K-LMAL-116A
基本信息
产品名称：
L-苹果酸检测（手动格式）,K-LMAL-116A
英文名称：
L-Malic Acid Assay Kit (Manual Format)
国产/进口：
进口
产地/品牌：
爱尔兰/Megazyme
型号：
手动116次，微板1160次
参考报价：
优惠
销售商：
总点击数：
3840
更新日期：
2026-04-01
产品类别：
性能参数
简介：
作为柠檬酸循环的一个组成部分，L-苹果酸（L-苹果酸）存在于所有生物体中。其定量测定在葡萄酒、啤酒、面包、水果和蔬菜产品的制造以及化妆品和药品中尤为重要。它是最重要的果酸之一，在葡萄酒中的所有酸中浓度最高。在葡萄酒行业，在苹果酸乳酸发酵过程中，L-苹果酸和L-乳酸的水平都会受到监测。L-苹果酸作为食品防腐剂（E296）和增味化合物有许多应用，例如在低热量饮料的制造中。
这是一种手动分光光度法和微孔板法，用于定量测定L-苹果酸。另L-苹果酸试剂盒已针对自动分析仪应用进行了优化（见产品K-LMALAF）。
原理：
L-苹果酸的检测需要两个酶反应。在L-苹果酸脱氢酶（L-MDH）催化的第一个反应中，L-苹果酸被烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD+）氧化为草酰乙酸（1）。
（L-MDH）
（1） L-苹果酸+NAD+—>草酰乙酸+NADH+H+
然而，由于反应（1）的平衡坚定地有利于L-苹果酸和NAD+，因此需要进一步的反应来“捕获”NADH产物，这是通过在大量过量L-谷氨酸存在的情况下，通过谷氨酸-草酰乙酸转氨酶（GOT）将草酰乙酸转化为L-天冬氨酸和2-酮戊二酸来实现的（2）。
（GOT）
（2） 草酰乙酸+L-谷氨酸—>L-天冬氨酸+2-氧戊二酸
在上述偶联反应中形成的NADH的量与L-苹果酸的量是化学计量的。NADH是通过340nm处吸光度的增加来测量的。
基于这一原则的方法得到了IFU、AIJN、MEBAK和OIV的推荐，并得到了AOAC International的批准。该方法包含在许多国家的食品法和欧洲法规中。
特异性、敏感性、线性和精密度：
该检测方法对L-苹果酸具有特异性。D-苹果酸、L-乳酸、L-天冬氨酸和富马酸不反应。
该测定的最小区分吸光度为0.005吸光度单位。这相当于最大样品体积为2.00 mL时0.12 mg/L的样品溶液（或样品体积为0.10 mL时为2.49 mg/L）。检测限为0.25mg/L，这是由0.010的吸光度差和2.00mL的最大样品体积得出的。
每次测定的L-苹果酸含量在0.5至30μg范围内呈线性。在使用一种样品溶液进行两次测定时，可能会出现0.005至0.010的吸光度差。样品体积为0.10 mL，这对应于样品溶液中L-苹果酸浓度约为2.49至4.98 mg/L。如果在样品制备过程中稀释了样品，则将结果乘以稀释因子F。如果在样品准备过程中称重样品，例如10 g/L，则预计会有0.02至0.05 g/100 g的差异。
干扰：
如果L-苹果酸的转化在测定中规定的时间内（约3分钟）完成，通常可以得出结论，没有发生干扰。然而，这可以通过在反应完成时向试管中加入L-苹果酸（约15μg，0.10 mL）来进一步检查。应观察到吸光度显著增加。
通过加入内标，可以识别被分析样品中的干扰物质。预计该标准的定量回收。通过进行回收实验，即在初始提取步骤中向样品中添加L-苹果酸，来识别样品处理和提取过程中的损失。聚乙烯吡咯烷酮已被纳入分析系统，以防止样品中多酚（单宁）的抑制。
提供适用于手动形式的116测定（或微孔板形式的1160测定）的试剂盒。试剂盒包含：
瓶1：缓冲液（12 mL，pH 10.0）加L-谷氨酸盐和叠氮化钠（0.02%w/v）作为防腐剂。
在4°C下稳定2年以上。
瓶2：（x2）NAD+加PVP。在-10°C以下稳定5年以上。
瓶3：谷氨酸-草酰乙酸转氨酶混悬液（2.5 mL）。 在4°C下稳定2年以上。
瓶4: L-苹果酸脱氢酶悬浮液（2.5 mL）。 在4°C下稳定2年以上。
瓶5: L-苹果酸标准溶液（5 mL，0.15 mg/mL）。稳定2年以上；在4°C下密封储存。
试剂溶液/悬浮液的制备：
1.使用随附的瓶子1中的内容物。在4°C下稳定2年以上。
2.将瓶子2的内容物溶解在6ml蒸馏水中。
在4°C下稳定>1年，或在-10°C以下稳定>2年（为避免重复的冻融循环，分为适当大小的等分试样并储存在聚丙烯管中）。
在需要之前，不要溶解第二瓶的内容物。
3 & 4.使用随附的瓶子3和4中的内容物。在第一次打开之前，摇动瓶子以去除可能沉积在橡胶塞上的任何酶。随后，将瓶子垂直存放。在4°C下密封稳定>2年。
5. 使用提供的瓶子5中的内容物。稳定2年以上；在4°C下密封储存。
注：L-苹果酸标准溶液仅在对所用分光光度计的准确性有疑问或怀疑样品中的物质引起抑制的情况下进行测定。L-苹果酸的浓度直接由NADH的消光系数决定。
概要：
规格：116项测定（手动）/1160项测定（微孔板）
运输温度：环境温度
储存温度：短期稳定性：2-8°C，
长期稳定性：见瓶身
稳定性：在推荐的储存条件下>2年
分析物：L-苹果酸
检测形式：分光光度计、微孔板
检测方法：吸光度
波长（nm）：340
信号响应：增加
线性范围：每次测定0.5至30µg L-苹果酸
检测限：0.25mg/L
反应时间（分钟）：~3分钟
应用示例：葡萄酒、啤酒、果汁、软饮料、糖果、水果和蔬菜、面包、化妆品、药品和其他材料（如生物培养物、样品等）。
如果所有体积减半，使用MegaQuantTM波分光光度计（D-MQWAVE）可使手动测试次数加倍。
详见》http://equl.cn/goods.php?id=169
作为柠檬酸循环的一个组成部分，L-苹果酸（L-苹果酸）存在于所有生物体中。其定量测定在葡萄酒、啤酒、面包、水果和蔬菜产品的制造以及化妆品和药品中尤为重要。它是最重要的果酸之一，在葡萄酒中的所有酸中浓度最高。在葡萄酒行业，在苹果酸乳酸发酵过程中，L-苹果酸和L-乳酸的水平都会受到监测。L-苹果酸作为食品防腐剂（E296）和增味化合物有许多应用，例如在低热量饮料的制造中。
这是一种手动分光光度法和微孔板法，用于定量测定L-苹果酸。另L-苹果酸试剂盒已针对自动分析仪应用进行了优化（见产品K-LMALAF）。
原理：
L-苹果酸的检测需要两个酶反应。在L-苹果酸脱氢酶（L-MDH）催化的第一个反应中，L-苹果酸被烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD+）氧化为草酰乙酸（1）。
（L-MDH）
（1） L-苹果酸+NAD+—>草酰乙酸+NADH+H+
然而，由于反应（1）的平衡坚定地有利于L-苹果酸和NAD+，因此需要进一步的反应来“捕获”NADH产物，这是通过在大量过量L-谷氨酸存在的情况下，通过谷氨酸-草酰乙酸转氨酶（GOT）将草酰乙酸转化为L-天冬氨酸和2-酮戊二酸来实现的（2）。
（GOT）
（2） 草酰乙酸+L-谷氨酸—>L-天冬氨酸+2-氧戊二酸
在上述偶联反应中形成的NADH的量与L-苹果酸的量是化学计量的。NADH是通过340nm处吸光度的增加来测量的。
基于这一原则的方法得到了IFU、AIJN、MEBAK和OIV的推荐，并得到了AOAC International的批准。该方法包含在许多国家的食品法和欧洲法规中。
特异性、敏感性、线性和精密度：
该检测方法对L-苹果酸具有特异性。D-苹果酸、L-乳酸、L-天冬氨酸和富马酸不反应。
该测定的最小区分吸光度为0.005吸光度单位。这相当于最大样品体积为2.00 mL时0.12 mg/L的样品溶液（或样品体积为0.10 mL时为2.49 mg/L）。检测限为0.25mg/L，这是由0.010的吸光度差和2.00mL的最大样品体积得出的。
每次测定的L-苹果酸含量在0.5至30μg范围内呈线性。在使用一种样品溶液进行两次测定时，可能会出现0.005至0.010的吸光度差。样品体积为0.10 mL，这对应于样品溶液中L-苹果酸浓度约为2.49至4.98 mg/L。如果在样品制备过程中稀释了样品，则将结果乘以稀释因子F。如果在样品准备过程中称重样品，例如10 g/L，则预计会有0.02至0.05 g/100 g的差异。
干扰：
如果L-苹果酸的转化在测定中规定的时间内（约3分钟）完成，通常可以得出结论，没有发生干扰。然而，这可以通过在反应完成时向试管中加入L-苹果酸（约15μg，0.10 mL）来进一步检查。应观察到吸光度显著增加。
通过加入内标，可以识别被分析样品中的干扰物质。预计该标准的定量回收。通过进行回收实验，即在初始提取步骤中向样品中添加L-苹果酸，来识别样品处理和提取过程中的损失。聚乙烯吡咯烷酮已被纳入分析系统，以防止样品中多酚（单宁）的抑制。
提供适用于手动形式的116测定（或微孔板形式的1160测定）的试剂盒。试剂盒包含：
瓶1：缓冲液（12 mL，pH 10.0）加L-谷氨酸盐和叠氮化钠（0.02%w/v）作为防腐剂。
在4°C下稳定2年以上。
瓶2：（x2）NAD+加PVP。在-10°C以下稳定5年以上。
瓶3：谷氨酸-草酰乙酸转氨酶混悬液（2.5 mL）。 在4°C下稳定2年以上。
瓶4: L-苹果酸脱氢酶悬浮液（2.5 mL）。 在4°C下稳定2年以上。
瓶5: L-苹果酸标准溶液（5 mL，0.15 mg/mL）。稳定2年以上；在4°C下密封储存。
试剂溶液/悬浮液的制备：
1.使用随附的瓶子1中的内容物。在4°C下稳定2年以上。
2.将瓶子2的内容物溶解在6ml蒸馏水中。
在4°C下稳定>1年，或在-10°C以下稳定>2年（为避免重复的冻融循环，分为适当大小的等分试样并储存在聚丙烯管中）。
在需要之前，不要溶解第二瓶的内容物。
3 & 4.使用随附的瓶子3和4中的内容物。在第一次打开之前，摇动瓶子以去除可能沉积在橡胶塞上的任何酶。随后，将瓶子垂直存放。在4°C下密封稳定>2年。
5. 使用提供的瓶子5中的内容物。稳定2年以上；在4°C下密封储存。
注：L-苹果酸标准溶液仅在对所用分光光度计的准确性有疑问或怀疑样品中的物质引起抑制的情况下进行测定。L-苹果酸的浓度直接由NADH的消光系数决定。
概要：
规格：116项测定（手动）/1160项测定（微孔板）
运输温度：环境温度
储存温度：短期稳定性：2-8°C，
长期稳定性：见瓶身
稳定性：在推荐的储存条件下>2年
分析物：L-苹果酸
检测形式：分光光度计、微孔板
检测方法：吸光度
波长（nm）：340
信号响应：增加
线性范围：每次测定0.5至30µg L-苹果酸
检测限：0.25mg/L
反应时间（分钟）：~3分钟
应用示例：葡萄酒、啤酒、果汁、软饮料、糖果、水果和蔬菜、面包、化妆品、药品和其他材料（如生物培养物、样品等）。
如果所有体积减半，使用MegaQuantTM波分光光度计（D-MQWAVE）可使手动测试次数加倍。
详见》http://equl.cn/goods.php?id=169
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