分子与细胞

microRNA质粒/载体构建

基本信息
服务名称:
microRNA质粒/载体构建
英文名称:
参考报价:
总点击数:
3482
更新日期:
2011-08-23
服务类别:

服务详情

microRNA 过表达载体构建

真核生物MicroRNA的产生有三种形式。1)miRNA以长的pri-miRNA形式从基因组中转录出来;2)pri-miRNA被RNAaseIII内切酶或剪接体组分切割,形成大约60~70nt的pre-miRNA;3)pre-miRNA被运出细胞核,进而在Dicer样内切酶切割下,形成miRNA。 

本公司提供miRNA质粒的构建服务,采用U6、CMV启动子构建的miRNA表达载体,可以在细胞内直接转录出miRNA,行使其功能。同时还可以提供pre-miRNA表达载体及腺病毒载体 (Adenoviral),慢病毒载体(Lentiviral),逆转录病毒载体 (Retroviral) 病毒型载体构建服务。基于载体的miRNA构建流程:
 

1、客户可选:
    提供不同长度、不同形式,由客户自行设计的miRNA,由本公司将其克隆到miRNA表达载体上。
    也可据需要,提供来自Sanger miRNA数据库的miRNA序列,由本公司将其克隆到miRNA表达载体上。
    提供商业化的miRNA表达载体。

2、合成设计好的DNA序列,将其克隆到客户要求的载体上,并通过测序进行验证。


3、构建好的miRNA质粒连同测序文件、产品说明书一起寄送到客户手中。

本公司的可免费提供的miRNA常用表达载体有:
载体名称 启动子 筛选基因 标记基因
pRNAi-U6.1/Neo  U6  Neomycin  GFP 
pRNAi-CMV3.2/Neo  CMV  Neomycin  GFP 
pRNAi-CMV4.1/Neo
(pSilencer4.1) 
CMV  Neomycin    
 
microRNA靶基因报告载体/ 荧光素酶报告载体构建 

A. 优点:
MiRNA 荧光素酶报告载体具有以下优点:
· 功能性检测:是一种功能性的分析方法,用于监测细胞内miRNA介导的靶基因的调控
· 可定量分析: miRNAs介导的调控可以通过荧光素酶基因的表达进行定量监测
· 可构建稳定细胞系–载体可用于构建表达报告基因的稳定细胞系.
B. 原理:
pLuc-3UTR报告载体是一系列基于荧光素酶报告的构建体,用于监测miRNA介导的细胞内靶基因调控。每个载体含有CMV启动子、荧光素酶基因、3 ' UTR 靶基因和SV40终止子序列。MiRNA的表达并与3 ' UTR结合,导致荧光素酶基因表达的抑制。因此miRNA介导的特异靶的调控可通过荧光素酶活*进行监测。比较二个样本荧光素酶活性可解析调控,明确差异。

本公司的可免费提供的microRNA靶基因报告载体 有: 

载体名称 启动子 标记基因
pGL4.17  CMV   荧光素酶基因 
pGL-Basic  CMV  荧光素酶基因 
pGL3-Control  CMV  荧光素酶基因 
pRL-TK  CMV   荧光素酶基因 
公司简介

百奥迈科(Biomics)生物技术有限公司(原“百奥生物技术(南通)有限公司)是由国家级“千人计划”引进人才—朱远源博士率领的海归团队于2006年在南通经济技术开发区创立,注册资本1212万美元,总投资2500万美元。工业用地100亩,其中已建有一期一万平方米的国际标准生物厂房,设有一流的生产研发技术和设备。在目前近100名员工中,专业人员占78%,各团队均由国际一流的科学家及管理人才领军。经过三年多的发展,公司取得了瞩目的成绩,已获得国内外发明专利11项;具备了全国最大规模的生物及化学合成小核酸(siRNA)文库和基因药物靶点筛选的条件;是亚洲领先的核酸干扰(RNAi)药物研发公司,也是全球极少数集小核酸文库合成、药物靶点筛选、小核酸结构修饰、药物传输系统等四大技术平台于一体的小核酸产业化基地之一。

  公司建有核酸药物研发、生命科学及化学合成等三大研发/生产中心,并在美国西雅图和硅谷设立了“平台对接”的小核酸药物研发中心和销售平台。2009年,百奥迈科投资成立了江苏吉康生物技术有限公司(子公司),将小核酸率先运用到皮肤美容及皮肤病领域,成为国际上首家小核酸健康产品的供应商。

  目前公司已经形成以科研试剂和技术外包服务为短线产品、以祛斑美白小核酸特效皮肤系列产品为中线产品以及以第三代生物制药及核酸药物研发、生产和销售为长线产品的商务模式,其中正在研发的治疗老年黄斑变性(AMD)、肝癌、乙型肝炎等疾病的多项小核酸药物均已达到国际前沿水平,某些方面已取得突破性进展,达到国际先进水平并填补了同行业空白。百奥迈科将专注于开发具有自主知识产权的小核酸产品药物,致力于解决人类疑难杂症,造福人类卫生健康事业。

  公司还利用独有的专利技术和相关技术平台先后与澳大利亚本尼特(Benitec)公司和以色列Zetiq技术公司等进行了药物研发及诊断试剂的国际合作。


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