转基因动物模型基因打靶技术服务
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转基因动物模型基因打靶技术服务
转基因动物的方法，主要有4类：①融合法，包括精子融合法，微细胞介导融合等。②化学法，包括DNA—磷酸钙沉淀法、DEAE—葡聚糖法、染色体介导法等。③物理法，包括显微注射法、电脉冲法、细胞冻存法等。④病毒感染法，包括重组DNA病毒感染、重组RNA病毒感染等。但真正成熟并可以稳定生产转基因动物的方法只有三种，即核显微注射DNA法、精子介导法和核移植法等基因转移方法。
体细胞核移植方法大体内容：体细胞核移植是近年来新出现的一种转基因技术。该方法是先把外源基因与供体细胞在培养基中培养，使外源基因整合到供体细胞上，然后将供体细胞细胞核移植到受体细胞——去核卵母细胞，构成重建胚，再把其移植到假孕母体，待其妊娠、分娩，便可得到转基因的克隆动物。
显微注射法大体的技术服务流程包括以下四部分：
1.打靶载体设计与构建：
项目起始后，根据客户项目的具体情况和要求，百恩维生物的技术专家将在一周内提供给客户打靶载体设计方案，包括示意图及具体的序列信息。经客户确认设计方案后，百恩维将开始构建打靶载体。
2.打靶成功的ES细胞筛选：
打靶载体经测序验证正确后，需线性化打靶载体，然后通过电转化法导入ES细胞。通过载体上的正筛选和负筛选基因得到可能包含正确插入片段或替换片段的ES克隆。扩增这些ES克隆，提取基因组DNA。通过专门设计的引物用PCR方式鉴定ES克隆在基因组上的插入或置换位点是否正确。
3.由打靶ES细胞囊胚注射得到嵌合体动物：
扩增经鉴定插入或置换片段位置正确的打靶ES克隆，以囊胚显微注射的方式将一定数量的
4.打靶ES细胞注入动物囊胚中：
由嵌合体动物繁殖出生殖遗传系基因打靶动物将嵌合体动物与适当品系的动物交配，后代出生后，通过PCR方式检测动物是否含有打靶序列。如有，则该动物为具备生殖遗传能力的基因打靶动物。
公司简介
百恩维生物科技有限公司（BioWit Technologies），是一家专业从事生物科技前沿技术研发的高新技术企业。为国内外众多药厂和科研机构提供病毒包装，蛋白表达，载体构建，干细胞培养基，转染试剂、细胞因子等产品及技术服务。公司专家团队曾在国内外知名学府和国际一流制药公司从事研发多年。
百恩维生物在深圳宝安高新奇工业园拥有世界一流的生物学实验室，包括多种先进的实验设备，以及一批经验丰富的技术人员。为客户提供最全面的病毒包装技术服务，除了常规病毒类型，还有非整合型慢病毒，9种血清型的腺相关病毒等极有特色的病毒包装服务。
百恩维为客户生产的干细胞培养基已经进入多项临床前试验阶段，产品质量控制指标达到临床使用样品要求。百恩维生物还提供数千种重组蛋白、以及转染试剂等产品。
百恩维生物建立起完善质量保证体系，所有产品均有卓越的质量保证。
百恩维生物已经拥有自主知识产权的产品2项，发明专利技术3项，并与国内外知名大学、中科院以及医科院等知名科研机构建立了良好的合作关系，在生物尖端技术方面能够持续创新。
百恩维生物将本着“专注、创新、诚信、和谐”的企业理念，为生物技术能够为人类健康造福而不懈追求！
●病毒包装技术服务：腺病毒、慢病毒、非整合型慢病毒、腺相关病毒、杆状病毒、逆转录病毒
● 载体构建：过表达载体、ShRNA表达载体、miRNA表达载体
● 蛋白表达与纯化：原核蛋白、真核蛋白、昆虫杆状病毒蛋白
● 干细胞培养基：干细胞无血清培养基、干细胞含血清培养基
●转染试剂：HET、Polyfectine、UES
●细胞因子：数千种细胞因子
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