miRNA实时荧光定量PCR全面解决方案
基本信息
服务名称：
miRNA实时荧光定量PCR全面解决方案
英文名称：
miRNA real-time quantitative PCR
参考报价：
详询021-60649912
服务商：
总点击数：
2836
更新日期：
2022-03-24
服务类别：
服务详情
一、技术路线
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样品RNA提取 |
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样品质量检测
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数据分析
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反转录
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特异性引物设计
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荧光定量PCR检测
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样品收集
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二、技术方法
2.1 样本miRNA提取
所需样本量：细胞（≥106）、组织（≥300mg）、血液（≥2ml）、血清（≥1.5ml）等样品材料，总RNA（≥20μl，浓度≥ 50ng/μl）；
样本保存：组织样本请保存在-80ºC或保存在Trizol中（液氮研磨后）或保存在RNAlater中（动物组织）；
样品运输：用冻存管保存，并用干冰或液氮运输。
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相关技术服务
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服务项目
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内容说明
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RNA提取
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从血液、组织、叶片等样本材料中提取总RNA
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血清RNA提取
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从1-5ml血清中提取总RNA
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石蜡包埋组织RNA提取
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从石蜡包埋的组织块中提取总RNA
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miRNA提取
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从细胞、血液、组织、叶片等多种样本材料中（石蜡包埋组织样本除外）提取是small RNA(<200nt)，miRNA纯度、丰度更高。
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2.2 样本质量检测
如果客户给的样本是已提取好的总RNA，需满足以下条件：
完整性：1.2%琼脂糖凝胶电泳出现两条带（28s、18s RNA），其中28s RNA条带的亮度是18s RNA条带亮度的1.5~2.0倍，否则说明RNA出现了降解。如果出现弥散片状或者条带缺失，则说明RNA样本出现严重降解，说明样本不可用； 纯度：OD260/OD280在1.8~2.1之间，比值最好为2.0（保存液为pH=7.0 的RNase free ddH2O）。DNA 应该去除干净； 浓度：最低浓度不低于200ng/μl，每个样品总量不少于10μg； 保存条件：要溶解在H20或TE (pH 8.0)，用冻存管保存，并用干冰或液氮运输;。注：建议在条件允许情况下，提供可供两次样品制备的量，以确保实验质量及延续性。
2.3反转录
miRNA的cDNA第一链合成有两种方法：
加尾法 茎环法2.4 荧光定量检测
SYBR Green I法 Taqman探针法
公司简介
公司介绍:上海百趣生物医学科技有限公司（简称百趣生物）成立于2013年4月，是一家专业提供生命科学前沿研究技术应用、咨询及开发的高新技术企业。百趣生物专注于创新质谱技术在生命科学研究与医学健康两大领域的应用，尤其在生命科学研究领域，公司在国内市场获得了优秀的口碑。自成立以来，百趣生物相继被认定为国家高新技术企业、高新技术成果转化项目、上海市科技型中小企业技术创新资金资助项目，百趣实验室相继取得了病原微生物实验室BSL-2备案、CMA认证。公司目前已经建立并完善的代谢组学平台，包括非靶标代谢组、高通量靶标代谢组、常规靶标代谢组、脂质组学、代谢流检测，同时建立了蛋白质组学平台，提供靶向及非靶向蛋白组学、修饰蛋白质组学、多肽组学等业务。
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公司官网：www.biotree.cn
售后服务
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