基因敲除小鼠
服务详情
完全性基因敲除（Knockout，KO）小鼠，也叫全身性基因敲除小鼠，是通过基因敲除技术，把需要敲除目的基因的所有外显子或几个重要的外显子或者功能区域敲除掉，获得全身所有的组织和细胞中都不表达该基因的小鼠模型。
TurboKnockout®完全性基因敲除小鼠
TurboKnockout®完全性基因敲除小鼠是通过TurboKnockout®技术把需要敲除目的基因的所有外显子或几个重要的外显子或功能区域敲除掉，使得全身所有的组织和细胞中都不表达该基因。建立在传统基因打靶技术之上的TurboKnockout®基因编辑技术不仅具有传统ES打靶技术成熟、修饰准确、效果稳定等优点，更是使得传统ES打靶技术减少两代繁育时间，周期快至4个月，是大片段基因修饰等复杂模型的常用构建方式。
TurboKnockout®完全性基因敲除小鼠的建系原则与流程：
1. 去除抗性基因Neo：选择阳性TurboKnockout®小鼠与野⽣型小鼠杂交，自删除Neo，获得去除打靶载体中的Neo基因的F1代杂合子KO（+/-）小鼠。
2. 再挑选⼀对F1代杂合子KO小鼠（+/-）进行自交，通过PCR鉴定筛选得到基因敲除的F2纯合子KO小鼠（-/-）。
CRISPR-Pro完全性基因敲除小鼠
CRISPR-Pro完全性基因敲除小鼠主要采用靶基因设计和构建gRNA与Cas表达质粒，造成目的基因的功能区域被敲除，获得全身所有的组织和细胞中都不表达该基因的小鼠模型。CRISPR-Pro技术沿用核酸酶介导的基因修饰技术体系，采用独特的受精卵处理方式使受精卵偏好同源重组修复路径，进而提高同源重组效率，制作周期快至3个月。
CRISPR-Pro完全性基因敲除小鼠的建系原则与流程：
1. 通过针对一个或多个靶基因或靶基因不同位点设计、构建相应的gRNA质粒，体外转录为RNA后，与Cas蛋白和mRNA⼀起原核显微注射获得测序鉴定阳性的F0代阳性小鼠。
2. F0代阳性小鼠与野⽣型小鼠进行交配，获得PCR和测序鉴定阳性的F1代杂合子小鼠。
3. 选择来自同⼀只F0代小鼠，基因型⼀致的F1代杂合小鼠，达到性成熟后互配，可获得F2代小鼠。对获得的F2代小鼠进行PCR及测序鉴定，理论上，F2代小鼠中25%为纯合子，50%为杂合子，25%为野生小鼠。
公司简介
赛业生物成立于2006年，是国家高新技术企业、国家专精特新小巨人企业，致力于以卓越的模型和服务助力全球生命科学。赛业生物以动物模型和细胞模型为依托，建立了以基因编辑技术为基础的体内体外疾病模型平台，包含智能的基因编辑模式动物和高通量体外细胞模型编辑平台、高效的饲养繁育服务和创新性药物筛选评价模型，从模型到表型功能验证，全方位智能化满足客户在基础研究和新药研发领域体内体外模型需求。同时，赛业生物不断丰富产品线，强化数据和模型优势，打造了以药物评价模型为依托的创新性CRO服务平台，涵盖以免疫重建模型为特色的肿瘤药效平台、以眼科为特色的基因治疗药效平台、聚焦神经、代谢、心血管领域的以核酸药为特色的药效平台和以HUGO-Ab®全人源化抗体小鼠为特色的抗体发现平台，在赛道转换中再次腾飞。
赛业生物目前员工人数超900名，总规模超40000平方米，在中国广州、苏州、固安设立有全资子公司，在北京、上海、武汉等城市设有办事处，在美国加州、波士顿和日本大阪设有子公司。赛业生物已和全球100多个国家和地区的科学家及企事业单位建立了广泛的合作，产品与技术已直接应用于包括CNS（Cell, Nature, Science）三大期刊在内的超10925篇学术论文。秉承着为生命科学创造无限可能的企业愿景，赛业生物愿与全球医药研发人员共拓美好未来！
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