转基因

小鼠基因敲除/敲入服务

基本信息
服务名称:
小鼠基因敲除/敲入服务
英文名称:
参考报价:
详情请联系025-58641534
总点击数:
1955
更新日期:
2021-02-20
服务类别:

服务详情

国家遗传工程小鼠资源库(NRCMM)暨南京大学模式动物研究所(MARC)是中国最大的遗传工程小鼠资源库。 除了拥有500多种小鼠品系外,我们从2005年开始,对外提供基因工程改造小鼠的定制服务,包括转基因(TG)和敲除/敲入(KO/KI)服务。 其中敲除/敲入服务又包括全身性敲除(Conventional KO)、条件性敲除(Conditional KO)、点突变敲入(Target Mutation KI)以及人源化(Humanised) 小鼠的制作以及更为复杂的多次打靶小鼠的制作。

我们负责打靶基因的文献调研,根据您的需求量身定制所需要的打靶小鼠,并进行相应的评估,最大限度的节约您的时间和降低风险,得到您满意的特制小鼠模型。

我们的流程包括打靶载体设计、ES cells打靶、囊胚注射、小鼠繁育、遗传鉴定以及胚胎冷冻,小鼠定制服务灵活多变,可以随意选择您所需要的服务,您可以自行提供打靶载体(要求见转基因小鼠)以及已经打靶完成的ES cells等,我们可以继续帮您完成后续操作。

定制流程:
1. 打靶载体设计
在确定方案后,我们会完成打靶载体的构建
在条件型敲除(Conditional KO)策略中,我们会利用同源重组技术。KO First与Conditional KO有相似之处,KO Firs是在Neomycin标记位置的元件更为复杂,是一个带有剪接受体位点的LacZ和Neomycin的合并体。这样,Neomycin作为筛选标记,功能与上述Conditional KO中一致,LacZ就能够作为reporter在目的基因的promoter启动下,与目的基因一同表达,可以方便地对目的基因的表达进行定位。同样,与Flpe表达品系交配可以删除LacZ-neo标记,转变成常规的Conditional KO的flox小鼠。

基因敲入(Knock In)是指在需要操作区域定制突变或则将外源基因整合进入此区域。例如在需要操作基因区域将一些特定的DNA片段或者某些报告基因(如EGFP、dsRed、LacZ等)通过同源重组的方式整合进入特定的基因区域,使操作基因区域发生突变或者带上某种报告基因的标记,进而对其进行研究。

2.ES cells 打靶:
之后我们会完成ES电转和阳性克隆筛选(PCR和Southern筛选),目前我们可以提供的ES细胞背景为C57BL/6或129S6,如果有特殊背景需要,请联系询问。

3. 囊胚注射:
打靶之后完成显微囊胚注射

4. 遗传鉴定:
最后对得到的小鼠进行鉴定,得到阳性嵌合小鼠,对阳性小鼠进行可遗传性检测,得到杂合子小鼠,最终向客户提供至少4只基因敲除的F1杂合子小鼠。

5. 胚胎冷冻:
我们将为您提供两年的此小鼠免费胚胎冷冻服务,随时为您提供此小鼠活体,不必担心您宝贵小鼠模型的丢失,以保证您能顺利进行实验。


请联系我们的相关项目经理

张明坤(项目经理)  电话:025-58641571
高天芸(项目经理)  电话:025-58641543
官敏(项目经理)      电话:025-58641534
 

公司简介

江苏集萃药康生物科技股份有限公司是一家专业从事人源化动物模型与药物筛选平台研发的高科技生物技术企业,成立于2017年。公司团队在模型动物领域拥有近20年经验。公司拥有领先的疾病模型、基因工程小鼠模型研发能力,为全球科研机构、药企提供模型创制、代理繁育、小鼠销售、表型分析、功能药效等一站式服务,是国际上品系数量最多的小鼠模型供应商之一。


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