荧光定量PCR服务
ECO Real-Time PCR技术指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号累积实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。利用荧光信号的变化实时检测PCR扩增反应中每一个循环扩增产物量的变化,通过Ct值和标准曲线的分析对起始模板进行定量分析。免费设计优化引物,使定量PCR反应扩增效率达到90%以上,使相对定量结果更可靠。
系统特点
1. 超高准确率的qPCR结果:动态范围> 9 logs线性范围;拥有检测低于1个拷贝的超高灵敏度;对于辨别5000-10000的高拷贝区域也有99%的可性度。
2. 良好的均一性和可重复性:没有边缘效应产生,整块板子Cq的标准偏差等于0.063;不同批次的重复性高(R2=0.996)。
3. 可以实现High Resolution Melt(HRM)分析:其应用在突变扫描、序列配对和基因分型等多个方面。
技术路线
样品要求
1) 样品类型:细胞、新鲜组织。
2) RNA样本要求:无明显降解,OD260/280值在1.9~2.1之间,浓度≥100ng/ul;DNA应该去除干净;qPCR反应中,一个基因需要500ng RNA的量。
3) DNA样本要求:DNA无明显降解,OD260/280值在1.7~1.9之间,浓度≥ 50ng/μl;qPCR反应中,一个SNP位点需要50ng DNA的量。
SNP分型服务
单核苷酸多态性(SNP,Single Nucleotide Polymorphism):是指在基因组水平上单个核苷酸变异所引起的DNA序列多态性。SequenomMassARRAY® 平台利用SNP位点两个等位基因之间的分子量差异来进行检测。基本原理为基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 (MALDI-TOF MS) 技术。
技术特点
1. 灵活:自由选择感兴趣的SNP位点,一张芯片上,样本和SNP位点的配对、样本数量及位置可以自由选择
2. 准确:直接检测测序分子量,准确度超过99.7%。
3. 高通量:一张芯片上可完成384个样品的多重IPLEX GOLD 实验;每个反应孔可实现18至40重反应。
技术路线
样品要求
1. DNA样品:
1)避免肝素抗凝,避免EDTA溶解,避免反复冻融;
2)DNA浓度约10ng/ul , OD260/OD280=1.8;
3) 每反应提供5ul DNA。
2. SNP位点:
序列格式:SNP位点前后各100bp,SNP以[A/G]表示,其它突变以N表示;