MTT原理：MTT分析法以活细胞代谢物还原剂3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di- phenytetrazoliumromide, MTT噻唑蓝为基础。MTT为黄色化合物，是一种接受氢离子的染料，可作用于活细胞线粒体中的呼吸链，在琥珀酸脱氢酶和细胞色素C的作用下tetrazolium环开裂，生成蓝色的formazan结晶，formazan结晶的生成量仅与活细胞数目成正比（死细胞中琥珀酸脱氢酶消失，不能将MTT还原）。还原生成的formazan结晶可在含50%的N,N-二甲基甲酰胺和20%的十二甲基磺酸钠（pH 4.7）的MTT溶解液中溶解，利用酶标仪测定490 nm处的光密度OD值，以反映出活细胞数目。也可以用DMSO来溶解。MTT粉末和溶液保存时都需要避光，用铝箔纸包好就可以。实验的时候一般关闭超净台上的日光灯来避光，觉得这样比较好。

MTT步骤如下：
1.接种细胞：用含10％胎小牛血清得培养液配成单个细胞悬液，以每孔1000－10000个细胞接种到96孔板，每孔体积200ul.
2.培养细胞：同一般培养条件，培养3－5天（可根据试验目的和要求决定培养时间）。
3.呈色：培养3－5天后，每孔加MTT溶液（5mg/ml用PBS 配)20ul.
继续孵育4小时，终止培养，小心吸弃孔内培养上清液，对于悬浮细胞需要离心后再吸弃孔内培养上清液。每孔加150ul DMSO，振荡10分钟，使结晶物充分融解。
4.比色：选择490nm波长，在酶联免疫监测仪上测定各孔光吸收值，记录结果，以时间为横坐标，吸光值为纵坐标绘制细胞生长曲线。
 

客户需提供: 样本描述,相关的实验设计内容如作用时间和样本浓度等。 
 

实验具体收费、标本的收集、实验试剂的定购等事宜，请联系嘉美生物。
实验预约热线：400-698-4168   010-58464308   010-58464306
实验预约邮箱：

jiamei_bj@126.com   info@
 

中国生命科学实验技术服务、定制高端平台——嘉美生物实验技术中心

嘉美生物是一家主要从事Annexin V,信号转导抗体,重组人和动物蛋白,磷酸化抗体,各种动物ELISA试剂盒,生物实验服务等研发与销售的高科技生物公司,免费热线:400-698-4168。 业务咨询 QQ :1213084081  

相关文章

• 热点实验服务：凝胶电泳迁移率（EMSA）实验服务案例介绍
• 热点实验服务：免疫沉淀实验服务案例介绍
• 热点实验服务：激光共聚焦实验服务案例介绍
• 热点实验服务：明胶酶谱MMP活性检测实验服务案例介绍
• 热点实验服务：PKC蛋白激酶活性检测实验服务案例介绍
• 热点实验服务：Annexin V凋亡流式双染与Tunel凋亡免疫组化案例介绍
• 热点实验服务：细胞增殖毒性与Transwell（细胞迁移、侵袭）实验案例介绍
• 热点实验服务：实验课题整体外包服务案例介绍

嘉美生物，是一家专注于生命科学领域的高科技企业。公司成立于2004年，自成立以来，公司秉承“关注生物技术，服务生命科学”的理念，致力于服务广大科研工作者，提供优质产品及服务。让生命科学研究，“专业化，简单化，快速化”是嘉美人不懈追求的目标。
目前，公司独家代理美国ABGAB，GTS等公司的产品；全国总代理的品牌有：Abnova，ABR，Ebioscience，Neomarkers/Lbvision，Santa Cruz，Biovision，MP(美国分子探针公司)，Assay Design，Stressgen，Novus，Genetex等公司；经销代理：ABR，Alexis，Abgent，Amaxa，Bender，Chemicon，Linco，Cayman，Merck，Peprotech，KPL，SBA，Serotec，Upstate，Sigma，CST，R&D，Zymed，Biosource，Caltag，BioVendor，EPITOMICS，DSL，Finnzymes，Invivogen，Vector，GenWay，Roche，LifeSpan，Rockland，Mebtech，BD，Invitrogen，Bethyl，Jackson，Vector，Pierce，Biomol等公司产品。
嘉美的产品和服务涵盖生命科学研究技术的诸多方面,提供覆盖分子生物学、细胞生物学、免疫学等领域的实验室产品、生物技术服务以及专业生物统计分析等咨询服务。
面对日益激烈的市场竞争，公司将通过建立一支拥有专业、可靠、高效的队伍，努力在产品的售前、售中和售后都提供专业的技术服务，确保我们的用户和合作伙伴无后顾之忧。
嘉美生物正朝着多元化，集团化发展，将通过建立一支拥有专业、可靠、高效的队伍来确立嘉美生物在全球生物产业界的地位。
希望我们的专业、真诚和努力能赢得您的信赖！希望我们能携手走得更稳、更快、更远！