激光共聚焦显微术
激光共聚焦显微术原理:
Confocal 利用放置在光源后的照明针孔和放置在检测器前的探测针孔实现点照明和点探测,来自光源的光通过照明针孔发射出的光聚焦在样品焦平面的某个点上,该点所发射的荧光成像在探测针孔上,该点以外的任何发射光均被探测针孔阻挡。照明针孔与探测针孔对被照射点或被探测点来说是共轭的,因此被探测点即共焦点,被探测点所在的平面即共焦平面。
与传统显微镜相比的优点:
1. 抑制图像的模糊,获得清晰的图像;
2. 具有更高的轴向分辨率,并可获取连续光学切片;
3. 增加侧向分辨率;
4. 由于点对点扫描去除了杂散光的影响。
激光共聚焦显微术凭借特有的优势,能用于很多检测,例如:蛋白定位、定量;三维重组;动态测量(活细胞中Ca2+分布和浓度变化、自由基的检测、药物在细胞中的动态分布、H+浓度、线粒体膜电位等等),科佰生物以OLYMPUS FV1000为平台,成功为众多客户完成相关的实验,提高了实验的质量,发了更高分的文章。
定位、定量分析:
免疫荧光标记(单标、双标或三标)的定位、定量:如:细胞膜受体或抗原的分布,微丝、微管的分布、 两种或三种蛋白的共存与共定位、蛋白与细胞器的共定位、核转录因子转位、干细胞的增值和分化、细胞凋亡和染色体基因定位等等。
简易步骤:
1. 切片或者爬片的制备;
2. 固定和透膜(膜蛋白不需要透膜);
3. 封闭;
4. 一抗;
5. 二抗;
6. 染核;
7. 封片;
8. 拍摄;
9. 数据分析。
Ca2+浓度变化:
Ca2+是细胞内最为重要的阳离子和细胞信使之一,它对于细胞递质信号释放、细胞间信息传递、细胞电生理共功能的维稳具有重要意义。激光共聚焦显微镜(LCSM)利用可见光激发荧光探针并结合计算机图像处理,可以对细胞内Ca2+的浓度进行实时动态分析检测,其优点就是连续对同一细胞层面进行连续扫描和分析,动态的观察钙离子浓度变化并转化为可识别的荧光强度信号。
荧光探针多为Ca2+螯合剂,不与Ca2+结合时不发荧光,通常也不能进入细胞膜,只有与乙酰甲酯AM相连方可进入细胞内,被细胞内酯酶水解后并与胞内游离钙结合后发出荧光。
服务说明:
1. 激光共聚焦显微镜应用广泛,具体意向的实验请先联系; 2. 激光共聚焦显微镜每次开机都会有损耗,样品过少,价格会是常规检测价格的2倍。 1、询价及订购请填写"询价单",并发送邮件至sales@cobioer.com
2、根据客户信息,我们会上门取样品 3、如需帮助,请发送邮件至tech@cobioer.com或拨打025-86880024,科佰生物的技术支持将竭诚为您服务。 |
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技术服务列表:
1.分子生物学:基因合成、引物合成、基因测序、核酸提取、载体构建、质粒抽提、PCR、Q-PCR、RT-PCR、定点突变、定点整合、定点敲除、甲基化检测、SNP检测等等
2.蛋白工程:原核、酵母、昆虫、哺乳动物蛋白表达系统
3.病毒包装:腺病毒、慢病毒
4.抗体工程:WB、ELISA、IP、IF、IHC、FACS、Confocal、磁珠分选、病理染色
5.细胞工程:细胞培养、细胞膜制备、稳定细胞株构建、细胞RNAi技术、细胞表型分析(凋亡、增殖、周期、迁移、侵袭、修复、克隆形成)
6.药物研发:GPCR、Kinase、Protease、Ionchannel、Nuclearreceptor
7.数据统计与分析
8.论文翻译与润色
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