服务简介-辉骏生物
不同的同位素培养基分别培养实验组和对照组细胞，达到体内标记的目的。在此基础上进行Co-IP实验，依靠抗原与抗体之间的专一性反应分离得到免疫复合物；之后，利用LC-MS/MS来定性和定量免疫复合物中的蛋白：当实验组与对照组中某个蛋白质的含量达到统计学差异时，判定这个蛋白质与诱饵蛋白质具有相互作用。

技术优势-辉骏生物
1、特异性强，结果可信，假阳性极低；
2、灵敏度高，样本需求量少；
3、高通量，能一次性检测到多种互作蛋白；
4、能直接检测出与bait蛋白互作的其它蛋白的相对含量

服务内容-辉骏生物
1、细胞同位素标记          
2、蛋白提取、免疫沉淀；    
3、蛋白分离
4、液质联用检测
5、数据库检索和定性、定量分析 
6、相互作用蛋白的生物信息学分析              

技术应用-辉骏生物
3.5.1野生型细胞系
1、分别用轻、重链氨基酸培养2组相同的野生型细胞，培养至第5~6代时做标记测试；
2、待标记完全后，取等量的2组细胞提取蛋白质；
3、提取的轻链、重链细胞总蛋白分别用Normal IgG和抗诱饵蛋白的特异性抗体做免疫共沉淀（Co-IP）；
4、混合轻、重链Co-IP产物，SDS-PAGE分离；
5、胶内酶切，肽段抽提、纯化；
6、LC-MS/MS定性和定量免疫复合物中的蛋白质

3.5.2基因过表达细胞系
1、构建兴趣基因(带标签)的过表达细胞系和对照细胞系；
2、分别用轻、重链氨基酸培养上述2组细胞系，培养至第5~6代时做标记测试；
3、待标记完全后，取等量的2组细胞混合并提取蛋白质；
4、轻、重链蛋白混合物用标签蛋白的抗体做Co-IP；
5、（1）若抗体和磁珠非化学偶联，Co-IP洗脱液中常有抗体干扰，需要用SDS-PAGE胶分离的方法先去除抗体轻、重链，之后做蛋白条带的胶内酶切并抽提肽段；
   （2）若抗体和磁珠已化学偶联，做SDS-PAGE确认是否无抗体干扰；在确保无干扰的情况下，进行溶液内酶切，之后做LC将肽段混合物分为多个组分；
6、胶内酶切的肽段组分或一维LC分离的肽段组分再经LC-MS/MS，得到免疫复合物中蛋白质的定性和定量信息。

3.5.3基因干扰细胞系
1、构建兴趣基因的干扰细胞系和对照细胞系；
2、分别用轻、重链氨基酸培养上述2组细胞系，培养至第5~6代时做标记测试；
3、待标记完全后，取等量的2组细胞混合并提取蛋白质；
4、轻、重链蛋白混合物用兴趣蛋白的抗体做Co-IP；
5、同上，亦可采用2种方法：
（1） SDS-PAGE分离蛋白质、胶内酶切；
（2） 溶液内酶切、LC分离肽段；
6、肽段再经LC-MS/MS，得到免疫复合物中蛋白质的定性和定量信息。

客户须知-辉骏生物

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       广州辉骏生物科技股份有限公司（原“广州辉骏生物科技有限公司”）成立于2008年，是一家为科研机构提供实验技术的专业公司，尤其擅长于蛋白质组学和分子生物学等技术。经过10多的不断努力与开拓进取，随着公司规模不断扩大，总部已经成功入驻广州黄埔区科学城国家级科技企业孵化器。
 

　　经过10多的不断努力与开拓进取，辉骏生物已经拥有一支经验丰富、优秀刻苦的蛋白质组学实验及蛋白核酸互作技术队伍。公司各类实验的技术人员均有着深厚的理论基础和丰富的实验经验。本公司秉承着严谨科学、优质高效、不断完善的服务理念，以蛋白质组学为中心，函括各类蛋白核酸互作、分子生物学、抗体测序等实验。面向生物医药企业、院校、科研机构、医院和个人，为生物医药研发、生命科学和医学研究提供全方位蛋白质组学实验解决方案。目前，我们已经与中科院华南植物研究所、广州肿瘤医院、中山大学、浙江大学、武汉大学、上海海洋大学、西南大学、厦门大学等全国60多家科研单位建立了广泛的项目合作。
 

 　 感谢多年来广大客户对辉骏生物的支持与信任，我们将一如既往地为大家提供优质、高效、精准的各类包括蛋白质组学、核酸蛋白互作、分子\细胞生物学、免疫沉淀试剂盒、抗体测序等着方面实验技术服务。本着客户至上的理念，辉骏生物科技的所有员工将竭诚为您服务，按时按质地向您提供各类实验报告。
 

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