串联亲和纯化/质谱
TAP/MS服务简介-辉骏生物
TAP/MS是Co-IP/MS的“近亲”,两者在寻找诱饵蛋白的互作蛋白以及纯化互作蛋白的原理方面非常相似。但是TAP/MS经过2步亲和纯化,而Co-IP/MS只有1步亲和纯化,故而TAP/MS可以有效减少非特异蛋白的结合。
基本流程:
构建含有目的基因的载体,使目的基因与2个不同的表位标签融合表达,如Flag、HA、His、CBP、SBP等等。辉骏生物采用Flag-HA双标签载体;载体转染细胞并表达融合蛋白“Flag-HA-诱饵蛋白”;细胞裂解提取总蛋白,经anti-flag树脂和anti-HA树脂的两步纯化和洗脱,更大限度了去除了假阳性蛋白。洗脱液进入质谱仪,分析鉴定与诱饵蛋白具有相互作用的蛋白。
TAP/MS技术优势-辉骏生物
1.TAP/MS得到的互作蛋白是在细胞内与诱饵蛋白结合的,符合体内真实生理情况,得到的结果可信度高。
2.采用两步纯化,可以有效的减少非特异蛋白的结合,并避免因过度冲洗而产生的复合体解离。
TAP/MS服务内容-辉骏生物
1.构建融合Flag-HA的诱饵蛋白真核表达载体或者慢病毒载体
2.载体瞬时转染靶细胞或包装慢病毒感染靶细胞
3.TAP纯化互作蛋白
4.质谱鉴定互作蛋白
TAP/MS服务须知-辉骏生物
服务项目 | 客户提供 | 交付产物 | 实验周期 |
TAP/MS-瞬转 | 1、诱饵基因的名称、序列、物种等相关信息或者诱饵基因的克隆产物 2、待研究的细胞 |
1、带有诱饵基因和flag-HA的真核表达载体 2、互作蛋白的质谱鉴定结果 |
1-2个月 |
TAP/MS-稳转 | 1、诱饵基因的名称、序列、物种等相关信息或者诱饵基因的克隆产物 2、待研究的细胞 |
1、带有诱饵基因和flag-HA的慢病毒表达载体 2、互作蛋白的质谱鉴定结果 3、稳定转染的细胞株 |
2.5-4个月 |
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广州辉骏生物科技股份有限公司(原“广州辉骏生物科技有限公司”)成立于2008年,是一家为科研机构提供实验技术的专业公司,尤其擅长于蛋白质组学和分子生物学等技术。经过10多的不断努力与开拓进取,随着公司规模不断扩大,总部已经成功入驻广州黄埔区科学城国家级科技企业孵化器。
经过10多的不断努力与开拓进取,辉骏生物已经拥有一支经验丰富、优秀刻苦的蛋白质组学实验及蛋白核酸互作技术队伍。公司各类实验的技术人员均有着深厚的理论基础和丰富的实验经验。本公司秉承着严谨科学、优质高效、不断完善的服务理念,以蛋白质组学为中心,函括各类蛋白核酸互作、分子生物学、抗体测序等实验。面向生物医药企业、院校、科研机构、医院和个人,为生物医药研发、生命科学和医学研究提供全方位蛋白质组学实验解决方案。目前,我们已经与中科院华南植物研究所、广州肿瘤医院、中山大学、浙江大学、武汉大学、上海海洋大学、西南大学、厦门大学等全国60多家科研单位建立了广泛的项目合作。
感谢多年来广大客户对辉骏生物的支持与信任,我们将一如既往地为大家提供优质、高效、精准的各类包括蛋白质组学、核酸蛋白互作、分子\细胞生物学、免疫沉淀试剂盒、抗体测序等着方面实验技术服务。本着客户至上的理念,辉骏生物科技的所有员工将竭诚为您服务,按时按质地向您提供各类实验报告。
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