Northern Blot
原理
在变性条件下将待检的RNA样品进行琼脂糖凝胶电泳，继而按照同Southern Blot相同的原理进行转膜和用探针进行杂交检测。
用途
检测样品中是否含有基因的转录产物（mRNA）及其含量。
方法与步骤
1. 用具的准备：
2．用RNAZaP去除用具表面的RNase酶污染用RNAZap擦洗梳子，电泳槽，刀片等，然后用DEPC水冲洗二次，去除RNAZap。
3．制胶：
4. RNA样品的制备在RNA样品中加入3倍体积的formaldehyde load dye和适当的EB（终浓度为10ug/ml）。混匀后，65℃空气浴15min。短暂低速离心后，立即放置于冰上5min。
5. 电泳：
6. 转膜
7. 探针的制备
8. 探针的纯化及比活性测定：
9．预杂交：
10．探针变性：
11．杂交：
12．洗膜：
13．曝光：
14．去除膜上的探针：将200ml 0.1%SDS（由DEPC水配制）煮沸后，将膜放入，室温下让SDS冷却到室温，取出膜，去除多余的液体，干燥后，可以保存几个月。
15．杂交结果
注意事项
操作应该小心，但不必紧张。用于RNA电泳、转膜的所有器械、用具均须处理以除去RNAse 酶，以免样品的降解。转膜时，注意膜和多孔渗水屏之间不要有气泡。
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