基因敲入小鼠
基本信息
服务详情
基因敲入小鼠是指通过基因工程的方法在目的基因位置引入特定的特变或外源基因的小鼠模型。
TurboKnockout®基因敲入小鼠
TurboKnockout®基因敲入小鼠是通过基于ES打靶技术的TurboKnockout®技术，在目的基因位置引⼊特定的突变或外源基因的小鼠模型。比如在目的基因上引入点突变（模拟人类遗传疾病模型），或将报告基因（如EGFP，mRFP，mCherry，mYFP，或LacZ等）通过同源重组的方式引入目的基因的特定位点，从而可以通过报告基因来跟踪目标基因的表达，也可以用报告基因取代小鼠本身的基因，使KO/KI同时发生。
TurboKnockout®基因敲入小鼠建系原则与流程：
- 去除抗性基因Neo：选择阳性TurboKnockout® KI小鼠与野生型小鼠杂交，自删除Neo，获得去除打靶载体中的Neo基因的杂合子F1代小鼠。
- 再挑选⼀对杂合子F1代小鼠进行自交，通过PCR鉴定筛选得到F2代纯合子KI小鼠。
CRISPR-Pro基因敲入小鼠
CRISPR-Pro基因敲入小鼠是通过CRISPR-Pro技术在目的基因位置引入特定的突变或外源基因，利用小鼠的表达调控元件指导目的基因表达。例如，将⼀个可视的标记基因（如GFP或lacZ）敲入⼀个基因位点，以取代目标基因的编码序列，达到跟踪该基因表达的目的。或者将⼀个标记或⼀个标签蛋⽩敲入编码序列的末端（少数情况下在前端）来形成⼀个融合蛋白，以达到对目标基因表达和插入位点进行检验的目的。
CRISPR-Pro基因敲入小鼠建系原则与流程：
通过针对靶基因设计、构建gRNA质粒并转录为RNA，再合成含有突变位点信息的donor oligo或donor vector，与Cas蛋白和mRNA⼀起原核显微注射获得测序鉴定阳性的F0代小鼠。
F0代阳性小鼠与野生型小鼠进行交配，获得PCR和测序鉴定阳性的F1代杂合子小鼠。
选择来⾃同⼀只F0代小鼠，敲入位点⼀致的F1代阳性小鼠，达到性成熟后进行同胞交配，可获得F2代小鼠。对获得的F2代小鼠进行PCR及测序鉴定，理论上，F2代小鼠中25%为敲入位点⼀致的纯合子小鼠，有50%为只有⼀条染色体敲入的杂合子小鼠，有25%为野生型小鼠。
公司简介
赛业生物成立于2006年，是国家高新技术企业、国家专精特新小巨人企业，致力于以卓越的模型和服务助力全球生命科学。赛业生物以动物模型和细胞模型为依托，建立了以基因编辑技术为基础的体内体外疾病模型平台，包含智能的基因编辑模式动物和高通量体外细胞模型编辑平台、高效的饲养繁育服务和创新性药物筛选评价模型，从模型到表型功能验证，全方位智能化满足客户在基础研究和新药研发领域体内体外模型需求。同时，赛业生物不断丰富产品线，强化数据和模型优势，打造了以药物评价模型为依托的创新性CRO服务平台，涵盖以免疫重建模型为特色的肿瘤药效平台、以眼科为特色的基因治疗药效平台、聚焦神经、代谢、心血管领域的以核酸药为特色的药效平台和以HUGO-Ab®全人源化抗体小鼠为特色的抗体发现平台，在赛道转换中再次腾飞。
赛业生物目前员工人数超900名，总规模超40000平方米，在中国广州、苏州、固安设立有全资子公司，在北京、上海、武汉等城市设有办事处，在美国加州、波士顿和日本大阪设有子公司。赛业生物已和全球100多个国家和地区的科学家及企事业单位建立了广泛的合作，产品与技术已直接应用于包括CNS（Cell, Nature, Science）三大期刊在内的超10925篇学术论文。秉承着为生命科学创造无限可能的企业愿景，赛业生物愿与全球医药研发人员共拓美好未来！
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