分子与细胞

CRISPR/Cas9基因敲除技术服务

基本信息
服务名称:
CRISPR/Cas9基因敲除技术服务
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458
更新日期:
2015-07-20
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服务详情

 

CRISPR/Cas9 产品及服务

产品

Puro标签-CRISPR/Cas9 质粒

GFP-CRISPR/Cas9 质粒

技术服务

Cas9慢病毒包装 

Cas9腺病毒包装

 

 CRISPR/Cas9 基因敲除原理介绍

CRISPR (clustered, regularly interspaced, short palindromic repeats)是一种来自细菌降解入侵的病毒 DNA 或其他外源 DNA 的免疫机制。在细菌及古细菌中,CRISPR系统共分成3类,其中Ⅰ类和Ⅲ类需要多种CRISPR相关蛋白(Cas蛋白)共同发挥作用,而Ⅱ类系统只需要一种Cas蛋白即可,这为其能够广泛应用提供了便利条件。

目前,来自Streptococcus pyogenes 的CRISPR-Cas9系统应用最为广泛。Cas9 蛋白(含有两个核酸酶结构域,可以分别切割DNA 两条单链。Cas9首先与crRNA及tracrRNA结合成复合物,然后通过PAM序列结合并侵入DNA,形成RNA-DNA复合结构,进而对目的DNA双链进行切割,使DNA双链断裂。 

由于PAM序列结构简单(5’-NGG-3’),几乎可以在所有的基因中找 到大量靶点,因此得到广泛的应用。CRISPR-Cas9系统已经成功应用于植物、细菌、酵母、鱼类及哺乳动物细胞,是目前最高效的基因组编辑系统。 

通过基因工程手段对crRNA和tracrRNA进行改造,将其连接在一起得到sgRNA(single guide RNA)。融合的RNA具有与野生型RNA类似的活力,但因为结构得到了简化更方便研究者使用。通过将表达sgRNA的原件与表达Cas9的原件相连接,得到可以同时表达两者的质粒,将其转染细胞,便能够对目的基因进行操作。

      图示:Cas9通过向导RNA结合到目标DNA上并进行切割 

 

 

公司简介

汉恒生物科技(上海)有限公司[简称汉恒生物]是一家专门从事生物技术服务和产品销售与研发的高科技企业,公司专注于为广大科研工作者提供腺病毒、慢病毒、逆转录病毒包装、细胞稳定株筛选、siRNA设计和microRNA研究服务。汉恒生物科技(上海)有限公司[简称汉恒生物]自成立之日起,就以“为客户提供最优质的服务和品质卓越的产品”为宗旨,凭借国际先进的实验设备和经验丰富的实验技术人员,获得了中国顶级病毒包装供应商的美誉,是全国唯一一家可以提供病毒现货的公司。汉恒生物科技(上海)有限公司[简称汉恒生物]提供的产品和服务具有产品质量好、滴度高、服务优及周期短等特点。
 


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