RNAi全套产品服务
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产品简介
当病毒基因、人工转入基因、转座子等外源性基因随机整合到宿主细胞基因组内,并利用宿主细胞进行转录时,宿主细胞常产生一些dsRNA。宿主细胞胞质中的核酸内切酶Dicer将dsRNA切割成多个具有特定长度和结构的小片段RNA(大约21~23 bp),即siRNA。siRNA在细胞内RNA解旋酶的作用下解链成正义链和反义链,继之由反义siRNA再与体内一些酶(包括内切酶、外切酶、解旋酶等)结合形成RNA诱导的沉默复合物(RNA-induced silencing complex,RISC)。RISC与外源性基因表达的mRNA的同源区进行特异性结合,RISC具有核酸酶的功能,在结合部位切割mRNA,切割位点即是与siRNA中反义链互补结合的两端。被切割后的断裂mRNA随即降解,从而诱发宿主细胞针对这些mRNA的降解反应。在正常生物体内,RNA干扰起到抗病毒、抑制基因过量表达的作用。
产品组成
产品比较
比较项目 | 化学合成siRNA | DNA载体shRNA | Lentiviral-shRNA | Adenoviral-shRNA |
siRNA结构 | 双链RNA或发夹结构RNA | 发夹结构RNA | 发夹结构RNA | 发夹结构RNA |
RNA干扰持续时间 | <72小时 | <10天 | >30天 | ~10天 |
适合的细胞系 | 转染效率大于70%的细胞 | 转染效率大于20%但是可以传代的细胞 | 几乎所有细胞 | 几乎所有细胞 |
单次制备费用 | 低 | 中 | 较高 | 高 |
重复使用费用 | 中 | 低 | 低 | 低 |
是否可自行扩增 | 不可以 | 可以 | 不可以 | 不可以 |
瞬时干扰实验 | 转染效率大于70%的细胞 | 转染效率大于20%但是可以传代的细胞 | 几乎所有细胞 | 几乎所有细胞 |
构建稳定表达siRNA的细胞株 | 不满足 | 满足,但有风险 | 满足,可以同时制备多种稳定表达细胞系 | 不满足 |
组织特异性干扰实验 | 不满足 | 满足 | 满足 | 满足 |
可诱导RNA干扰实验 | 不满足 | 满足 | 满足 | 满足 |
基因沉默后示踪实验 | 不满足 | 满足 | 满足 | 满足 |
裸鼠荷瘤实验 | 低重复性 | 低重复性 | 高重复性 | 高重复性 |
干细胞分化实验 | 不满足 | 不满足 | 满足 | 不满足 |
转基因knockdown实验 | 不满足 | 不满足 | 满足 | 不满足 |
应用领域
后续服务
1. 多种同类功能试验对阳性基因的验证;
2. 多细胞的验证;
3. 过表达该基因的回复验证;
4. 体内试验的验证(动物模型);
5. 功能基因下游的筛选(敲减后细胞的芯片检测,Western Blot验证);
6. 下游基因操作工具的制备;
7. 病例样本的检测(组织芯片检测);
8. 基因芯片检测;
9. 蛋白质芯片检测;
参考文献
1. "Li M, Rossi JJ." Lentiviral Vector Delivery of siRNA and shRNA Encoding Genes into Cultured and Primary Hematopoietic Cells. Methods Mol Biol. 2005;309:261-72.
2. "Fish RJ, Kruithof EK." Short-term cytotoxic effects and long-term instability of RNAi delivered using lentiviral vectors. BMC Mol Biol. 2004 Aug 3;5(1):9.
3. "Nishitsuji H, Ikeda T, Miyoshi H, Ohashi T, Kannagi M, Masuda T." Expression of small hairpin RNA by lentivirus-based vector confers efficient and stable gene-suppression of HIV-1 on human cells including primary non-dividing cells. Microbes Infect. 2004 Jan;6(1):76-85.
4. "An DS, Xie Y, Mao SH, Morizono K, Kung SK, Chen IS." Efficient lentiviral vectors for short hairpin RNA delivery into human cells. Hum Gene Ther. 2003 Aug 10;14(12):1207-12.
5. "Scherr M, Battmer K, Ganser A, Eder M." Modulation of gene expression by lentiviral-mediated delivery of small interfering RNA. Cell Cycle. 2003 May-Jun;2(3):251-7.
6. "Scherr M, Battmer K, Dallmann I, Ganser A, Eder M." Inhibition of GM-CSF receptor function by stable RNA interference in a NOD/SCID mouse hematopoietic stem cell transplantation model. Oligonucleotides. 2003;13(5):353-63.
7. "Abbas-Terki T, Blanco-Bose W, Deglon N, Pralong W, Aebischer P." Lentiviral-mediated RNA interference. Hum Gene Ther. 2002 Dec 10;13(18):2197-201.
8. Maurizio Federico, Lentivirus Gene Engineering Protocols (Methods in Molecular Biology) Humana Press; 1 edition, April 30, 2003
Tiscornia G, Singer O, Verma IM. Production and purification of lentiviral vectors.Nat Protoc. 2006;1(1):241-5.
9. Sena-Esteves M, Tebbets JC, Steffens S, Crombleholme T,Flake AW. Optimized large-scale production of high titer lentivirus vector pseudotypes. J Virol Methods 2004; 122:131–139.
10. Reiser J.Production and concentration of pseudotyped HIV-1-based gene transfer vectors.Gene Ther. 2000 Jun;7(11):910-3.
上海吉凯基因化学技术有限公司
地址:上海张江高科技园区爱迪生路332号 邮编: 201203
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吉凯基因成立于2002年,是一家以转化医学为核心模型的创新诊疗产品开发公司。
在国外,转化医学是创新药物形成的成熟模式,但在中国仍处于起步阶段。致力于与研究型医生共同解决中国特有、高发疾病的新药研发难题,开发属于中国人自己的创新药物,吉凯基因积极接轨国际成熟的创新药物形成模式,潜心深耕17年,目前已建成从基础研究到临床前研究再到临床研究的完整研究开发体系,形成独一无二的转化医学系统。
吉凯基因总部位于上海张江,目前在职员工超过500人,其中50%以上具有硕士学位,10%以上具有博士学位;拥有涵盖组学研究平台、载体制备平台、细胞与动物模型构建平台在内的全面基础科研平台以及1500m2的标准化GMP车间,可针对不同医生的临床科研需求展开合作,并协助研究型医生高效、高质的形成研究成果,目前已累计参与10000多篇SCI文章的基础科研工作,并申请专利121项,其中获得授权62项;PCT专利申请5项,其中获得美国授权2项。
基于工程化、系统化、产业化的专家系统及技术平台,吉凯基因与全国超过90%的研究型医院建立了良好的信任合作关系,累计助力研究型医生超过30%,在合作中不断加深对疾病机制的深刻理解,并发现数百个在中国特有、高发肿瘤中发挥关键作用的候选靶标基因,建成吉凯独特的疾病关键基因数据库,形成吉凯基因丰富的临床资源。
临床资源是吉凯基因新药开发的基础,吉凯基因在中国开创性地应用从疾病标志物及靶标发现、靶点验证到药物开发,最终到临床试验的全链条新药开发流程,与研究型医生共同进行基因治疗、细胞治疗以及抗体药物新靶标的研究,并挖掘具有开发转化前景的项目,利用自身所具备的新药开发能力,进行新药研发以及后期的成果转化。其中,CD19-CART在顶尖三甲医院进行的超过30例临床试验中获得极好的安全性及疗效,目前该项目已进入IND申报阶段,同时多个血液瘤和实体瘤项目也与临床医生共同推进至临床研究阶段。
“致力转化医学,共创健康明天”,吉凯基因将建立“以终为始”的基因诊疗品种创新创制平台,开发中国高发、少药和难诊疾病的先进诊疗产品,让患者因为吉凯的努力获得更高的五年生存率!
合作成果
作为基因功能研究的专业技术服务公司,吉凯基因为中国生命科学领域的科学家和医药企业提供了诚信和优质的服务。中国生物医学领域科学家发表的国际高质量科学论文中,截止2015年12月底,已经有近3000篇使用了吉凯基因的产品和服务,包括发表在Cell(影响因子33.116),Nature(影响因子42.351), Nature Neuroscience(影响因子14.976), Neuron(影响因子15.982)等杂志上的文章。应用案例中,详细列出了这些文章。
技术及研究资源
Affymetrix全基因组表达谱和miRNA芯片平台;
高效shRNA文库构建技术平台;
cDNA文库构建技术平台;
慢病毒、腺病毒、腺相关病毒的构建、包装和纯化技术平台;
基因作用靶点快速筛选技术平台;
药物作用靶点快速筛选技术平台;
稳定表达细胞株构建技术平台;
转基因小鼠平台。
市场覆盖
经过多年的努力,公司和遍及全国各地的、近300家3级甲等医院的临床科研工作者建立了稳固、持续的合作关系。
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