细胞增殖及相关服务--性能参数，报价/价格，图片

基本信息

服务名称：

细胞增殖及相关服务

英文名称：

参考报价：

021-51320189-8001询价

服务商：

上海吉凯基因医学科技股份有限公司

总点击数：

645

更新日期：

2020-11-06

服务类别：

分子与细胞

服务详情

细胞增殖及相关服务

服务流程

服务说明

细胞增殖是生物体生长、发育、繁殖、遗传的基础，是细胞最基本的生理活动。生长因子、激素及癌基因产物等均可诱导细胞的增殖或抑制细胞的增殖，通过影响细胞周期的运行、细胞凋亡的改变而实现。

MTT检测细胞增殖

MTT为一种化合物，全称为3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di- phenytetrazoliumromide。MTT比色法，是一种检测细胞存活和生长的方法，其检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT 还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。二甲基亚砜能溶解细胞中的甲瓒，用酶联免疫检测仪在 490nm波长处测定其光吸收值，在一定细胞数范围内，MTT结晶形成的量与细胞数成正比，因此MTT的吸光值可间接反映活细胞数量。该方法已广泛用于抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定等。
吉凯实验实例：
不同基因的过表达慢病毒感染细胞，继续培养三天后，收集对数期细胞，向96孔板每孔加入2000个细胞，细胞培养箱孵育至细胞贴壁,向孔板中加入MTT溶液，并继续培养4h。最后去除MTT，加入二甲基亚砜溶解MTT，酶标仪读取OD490时的吸光值。

CON：未处理细胞实验组；
NC：对照慢病毒感染实验组；
OE：目的基因过表达慢病毒感染实验组。
结论：目的基因过表达后，细胞生长受到抑制。
收费标准：2250元/组，MTT检测在96孔板中进行，60孔为一组实验。

克隆形成实验

是测定细胞的增殖能力的有效方法之一。单个细胞在体外持续6代以上，其后代所组成的细胞群称为克隆。这时每个克隆含有50个以上的细胞，大小在0.3~1.0mm之间，通过计数克隆形成率，可对单个细胞的增殖潜力做定量分析，了解细胞的增殖能力和独立生存能力。常用的方法有：平板克隆形成实验和软琼脂形成实验。
吉凯基因实验实例：
1、平板克隆形成：分别将阴性对照靶点和目的基因有效靶点慢病毒感染细胞，四天后，将处于对数生长期的细胞消化，计数后在6孔板培养板中接种500个细胞/孔，静置培养2周，中途隔3天换液并观察细胞状态，出现肉眼可见的克隆即终止培养，用多聚甲醛固定1h，再用Giemsa染色后，计数大于10个细胞的克隆。得到的实验结果如下：

实验结论：感染了目的基因靶点病毒的细胞，克隆形成能力减弱。
2、软琼脂克隆形成：分别将阴性对照靶点和目的基因有效靶点慢病毒感染细胞，四天后，将处于对数生长期的细胞消化；在孔板底部铺0.6%的琼脂糖，上层使用0.3%的琼脂糖和细胞的混液，置入培养箱中继续培养10天。把平皿放置在倒置显微镜下，观察细胞克隆数。得到的实验结果如下：

实验结论：感染了目的基因靶点病毒的细胞，克隆形成能力减弱。
收费标准：375元/well。

细胞周期

指细胞一个世代所经历的时间。从一次细胞分裂结束到下一次分裂结束为一个周期。细胞周期反应了细胞增殖速度。单个细胞的周期测定可采用缩时摄影的方法，但它不能代表细胞群体的周期，故现多采用其他方法测群体周期测定细胞周期的方法很多，最常用的是PI渗入测定细胞周期。PI ,即碘化丙锭,可以与细胞内DNA 和RNA 结合,采用RNA酶将RNA消化后,通过流式细胞术检测到的与DNA 结合的PI 的荧光强度直接反映了细胞内DNA含量的多少。由于细胞周期各时相的DNA 含量不同,通常正常细胞的 G0/G1 期具有二倍体细胞的DNA含量(2N) ,而G2/ M 期具有四倍体细胞的DNA 含量(4N) ,而S 期的DNA含量介于二倍体和四倍体之间。因此,通过流式细胞术PI染色法对细胞内DNA 含量进行检测时,可以将细胞周期各时相区分为 G0/G1 期,S 期和G2/ M 期,并可通过特殊软件计算各时相的百分率。
应用实例
分别将阴性对照靶点和目的基因有效靶点慢病毒感染细胞，继续培养四天后，洗涤消化并用预冷的70% 乙醇溶液固定细胞，1h后，PI染色，流式细胞仪检测，得到的周期实验结果如下：

实验结论：感染目的基因靶点病毒后，细胞处于G1期的细胞显著增加，处于S期的细胞显著减少，提示目的基因与细胞的周期分布显著相关。
收费标准：375元/well。

细胞凋亡

是指细胞在一定的生理或病理条件下，遵循自身的程序，自己结束其生命的过程。它是一个主动的，高度有序的，基因控制的，一系列酶参与的过程。细胞凋亡的过程大致可分为以下几个阶段：接受凋亡信号→凋亡调控分子间的相互作用→蛋白水解酶的活化（Caspase）→进入连续反应过程。
原理：在细胞凋亡早期位于细胞膜内侧的磷脂酰丝氨酸（PS)迁移至细胞膜外测。磷脂结合蛋白V（Annexin V）是一种钙依赖性的磷脂结合蛋白，它于PS具有高度的结合力。因此，Annexin V可以作为探针检测暴露在细胞外测的磷脂酰丝氨酸。故利用对PS有高度亲和力的Annexin V，将Annexin V标记上荧光素（如异硫氰酸荧光素FITC），用流式细胞仪即可检测凋亡细胞。细胞发生凋亡时，膜上的PS外露早于DNA断裂发生，因此Annexin V染色法检测早期细胞凋亡较TUNEL法更为灵敏；Annexin V染色法不需固定细胞，可避免PI染色因固定造成的细胞碎片过多及TUNEL法因固定出现的DNA片段丢失。因此，Annexin V法更加省时，简单，结果更为可靠，是目前最为理想的检测细胞凋亡的方法。
吉凯实验实例：
诱导凋亡药物紫杉醇处理乳腺癌MCF7细胞8小时后，消化并收集细胞，用PBS洗涤细胞三次，加入annexin V-APC染色，流式细胞仪检测。

左图为对照组，右图为加药处理组
收费标准：Annexin V单染实验费：375元/well；Annexin V和PI双染实验费：460元/well

上海吉凯基因化学技术有限公司
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公司简介

吉凯基因成立于2002年，是一家以转化医学为核心模型的创新诊疗产品开发公司。

在国外，转化医学是创新药物形成的成熟模式，但在中国仍处于起步阶段。致力于与研究型医生共同解决中国特有、高发疾病的新药研发难题，开发属于中国人自己的创新药物，吉凯基因积极接轨国际成熟的创新药物形成模式，潜心深耕17年，目前已建成从基础研究到临床前研究再到临床研究的完整研究开发体系，形成独一无二的转化医学系统。

吉凯基因总部位于上海张江，目前在职员工超过500人，其中50%以上具有硕士学位，10%以上具有博士学位；拥有涵盖组学研究平台、载体制备平台、细胞与动物模型构建平台在内的全面基础科研平台以及1500m²的标准化GMP车间，可针对不同医生的临床科研需求展开合作，并协助研究型医生高效、高质的形成研究成果，目前已累计参与10000多篇SCI文章的基础科研工作，并申请专利121项，其中获得授权62项；PCT专利申请5项，其中获得美国授权2项。

基于工程化、系统化、产业化的专家系统及技术平台，吉凯基因与全国超过90%的研究型医院建立了良好的信任合作关系，累计助力研究型医生超过30%，在合作中不断加深对疾病机制的深刻理解，并发现数百个在中国特有、高发肿瘤中发挥关键作用的候选靶标基因，建成吉凯独特的疾病关键基因数据库，形成吉凯基因丰富的临床资源。

临床资源是吉凯基因新药开发的基础，吉凯基因在中国开创性地应用从疾病标志物及靶标发现、靶点验证到药物开发，最终到临床试验的全链条新药开发流程，与研究型医生共同进行基因治疗、细胞治疗以及抗体药物新靶标的研究，并挖掘具有开发转化前景的项目，利用自身所具备的新药开发能力，进行新药研发以及后期的成果转化。其中，CD19-CART在顶尖三甲医院进行的超过30例临床试验中获得极好的安全性及疗效，目前该项目已进入IND申报阶段，同时多个血液瘤和实体瘤项目也与临床医生共同推进至临床研究阶段。

“致力转化医学，共创健康明天”，吉凯基因将建立“以终为始”的基因诊疗品种创新创制平台，开发中国高发、少药和难诊疾病的先进诊疗产品，让患者因为吉凯的努力获得更高的五年生存率！

合作成果

作为基因功能研究的专业技术服务公司，吉凯基因为中国生命科学领域的科学家和医药企业提供了诚信和优质的服务。中国生物医学领域科学家发表的国际高质量科学论文中，截止2015年12月底，已经有近3000篇使用了吉凯基因的产品和服务，包括发表在Cell（影响因子33.116）,Nature（影响因子42.351）, Nature Neuroscience（影响因子14.976）, Neuron（影响因子15.982）等杂志上的文章。应用案例中，详细列出了这些文章。