蛋白表达与纯化
基因工程的最终目的是在一个合适的系统中,使外源基因高效表达,从而产生有价值的蛋白质产品。
1.原核生物基因表达的特点
(1)原核生物(如大肠杆菌)只有一种RNA聚合酶,识别原核的启动子,能够催化所有RNA合成。
(2)原核生物的基因表达是以操纵子为单位。操纵子是数个相关的结构基因及其调控区的结合,是一个基因表达的协同单位。
(3)由于原核生物无核膜,所以转录与翻译是耦联的,二者也是连续进行的。原核生物染色体DNA是裸露的环型DNA,转录成mRNA后,可直接在胞浆中与核糖体结合翻译成蛋白质。每个核糖体可独立完成一条链的合成,多核糖体可同时在一条mRNA合成多条肽链,大大提高了翻译效率。
(4)原核基因不含内含子(intron),没有转录后加工过程。
(5)原核生物基因表达的控制主要是在转录水平。对RNA合成的调控有两种方式:启始控制(启动子控制)和终止控制(衰减子控制)。
实验流程图
服务流程图
实验结果
蛋白表达PAGE图
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