外泌体透射电镜检测
一、技术简介
外泌体(Exosome)是由细胞分泌而来的微小囊泡，直径约为30-200 nm，形态也呈现出多样性，有研究分为9个类别依次为：单囊泡、双囊泡、 多膜泡、小双层膜泡、椭圆膜泡、小管、大管、不完整的膜泡、不规则膜泡，其中在不同类别的囊泡中可以发现三个附加特征：表面具涂层的膜泡、内含纤维的膜泡、电子致密囊泡。
本司采取通过透射电镜确定外泌体大小。
二、实验流程
1. 外泌体戊二醛固定。
2. 清洗：用1mL PBS清洗3次，每次静置15min。
3. 锇酸固定：加入0.5 mL 2%锇酸溶液 4度固定2h。
4. 清洗：用1mL PBS清洗3次，每次静置15 min。
5. 脱水：用50%、70%、80%、90%乙醇各1mL梯度脱水分别静置15min，再用1mL 100%乙醇脱水2次，每次20min。
6. 置换：用1mL丙酮置换2次，每次静置15min。
7. 浸渍。
8. 包埋：将样品放入盛有纯包埋剂的包埋板中。
9. 聚合：将包埋板置于65℃条件下聚合48h。
10. 染色：醋酸双氧铀染色 10min后清洗；醋酸铅染色 10min后清洗。
11. 上机检测。
12. 提供实验报告。
三、服务说明及结果
1. 客户提供：外泌体（30 μl）或由我司分离得到外泌体。
2. 公司提供：基本实验步骤、图片、数据分析结果。
3. 实验周期：10个工作日。
研载生物科技（上海）有限公司（简称“研载生物”）是一家医学科研服务公司。
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