冷冻干燥菌种转接技术的操作方法与注意事项！
基本信息
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冷冻干燥菌种转接技术的操作方法与注意事项！
英文名称：
冷冻干燥菌种转接技术的操作方法与注意事项！
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770
更新日期：
2025-01-15
服务类别：
服务详情
冷冻干燥菌种转接技术的操作方法与注意事项！
建议用下列方法恢复培养冷冻干燥保藏的菌种。
一、安瓶管开封
1、用浸过70％酒精的脱脂棉擦净安瓿管。
2、用火焰将安瓿管顶端加热。
3、滴无菌水至加热的安瓿管顶端使玻璃开裂。
4、用挫刀或镊子敲下已开裂的安瓿管的顶端。
二、菌株恢复培养
1、用无菌吸管，吸取0.3～0.5ml适宜的液体培养基，滴人安瓿管内，轻轻振荡，使冻于菌体溶解呈悬浮状。
2、取0.1～0.2ml菌体悬浮液，移植于适宜的琼脂斜面／平板培养基上，剩余的菌液，注入适宜的液体培养基内，然后在建议的温度下培养。
3、若未能活化，或活化后有疑问时，请于收到菌种1个月内，通知保藏中心，经查证无误后，即免费补寄。
三、注意事项
1、菌种活化前，请将安瓿管保存在6一10℃的环境下。
2、厌氧菌的培养，如无特别说明，自开封至接种完成，均需以无氧气体充填，以保持厌氧状态。
3、某些菌种经过冷冻干燥保存后，延迟期较长，需连续两次继代培养才能正常生长，此时请将步骤二(2)重复一次。
液氮超低温保藏程序：
1、容器的选择：使用带螺旋盖的2ml塑料安培瓶。
2、检查安培瓶是否渗漏：用0.05%的亚甲基蓝水溶液在4℃浸泡30-45分钟，冲洗干净，弃去含有蓝色染料的安培瓶，其余的安培瓶备用。
3、打印标签(激光打印)。
4、容器的灭菌：先用蒸馏水漂洗干净安培瓶，再用蒸馏水在灭菌锅中121℃浸泡灭菌15分钟，干燥并将打印好的标签放入安培瓶中，略拧紧螺旋盖，再行121℃灭菌30分钟。
5、保藏菌菌龄：处于最大生长量阶段或对数生长期后期。
6、保护剂：选用5-10%的甘油或二甲基亚砜作保护剂。
北京百欧博伟生物技术有限公司的微生物菌种查询网提供微生物菌种保藏、测序、购买等服务,是中国微生物菌种保藏中心的服务平台，并且是集微生物菌种、菌种,ATCC菌种、细胞、培养基为一体的大型微生物查询类网站，自设设备及技术的微生物菌种保藏中心！欢迎广大客户来询！
https://www.biobw.org/
建议用下列方法恢复培养冷冻干燥保藏的菌种。
一、安瓶管开封
1、用浸过70％酒精的脱脂棉擦净安瓿管。
2、用火焰将安瓿管顶端加热。
3、滴无菌水至加热的安瓿管顶端使玻璃开裂。
4、用挫刀或镊子敲下已开裂的安瓿管的顶端。
二、菌株恢复培养
1、用无菌吸管，吸取0.3～0.5ml适宜的液体培养基，滴人安瓿管内，轻轻振荡，使冻于菌体溶解呈悬浮状。
2、取0.1～0.2ml菌体悬浮液，移植于适宜的琼脂斜面／平板培养基上，剩余的菌液，注入适宜的液体培养基内，然后在建议的温度下培养。
3、若未能活化，或活化后有疑问时，请于收到菌种1个月内，通知保藏中心，经查证无误后，即免费补寄。
三、注意事项
1、菌种活化前，请将安瓿管保存在6一10℃的环境下。
2、厌氧菌的培养，如无特别说明，自开封至接种完成，均需以无氧气体充填，以保持厌氧状态。
3、某些菌种经过冷冻干燥保存后，延迟期较长，需连续两次继代培养才能正常生长，此时请将步骤二(2)重复一次。
液氮超低温保藏程序：
1、容器的选择：使用带螺旋盖的2ml塑料安培瓶。
2、检查安培瓶是否渗漏：用0.05%的亚甲基蓝水溶液在4℃浸泡30-45分钟，冲洗干净，弃去含有蓝色染料的安培瓶，其余的安培瓶备用。
3、打印标签(激光打印)。
4、容器的灭菌：先用蒸馏水漂洗干净安培瓶，再用蒸馏水在灭菌锅中121℃浸泡灭菌15分钟，干燥并将打印好的标签放入安培瓶中，略拧紧螺旋盖，再行121℃灭菌30分钟。
5、保藏菌菌龄：处于最大生长量阶段或对数生长期后期。
6、保护剂：选用5-10%的甘油或二甲基亚砜作保护剂。
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