培养人类多功能干细胞和成人干细胞过程中基因突变带来的影响
AbMole精研抑制剂十年,最新的科研动态不断与您分享。本期与您分享的是:培养人类多功能干细胞和成人干细胞过程中基因突变带来的影响。
在体外培养过程中获得的遗传变化为干细胞在再生医学中的成功应用带来了风险。为了评估培养引起的遗传风险,本研究通过全基因组测序确定了单个人类干细胞中的所有突变。
研究结果显示,每个群体的单个多能,肠和肝干细胞累积分别为3.5±0.5、7.2±1.1和8.3±3.6碱基倍增。成年干细胞的年度体外突变累积率比体内突变累积率高近40倍。突变特征分析表明,体外诱导的突变是由氧化应激引起的。降低培养物中的氧气张力可降低突变负荷。本研究中使用突变率,光谱和基因组分布来模拟人干细胞在典型的体外扩增,操作或筛选实验过程中致癌突变的积累。本研究提供了经验定义的参数,以评估基于干细胞疗法的突变风险。
抑制剂Y-27632 (Abmole, M1817,纯度:99.66%)用于干细胞的培养,在每个克隆步骤后的前3天加10 µM于培养基中。
成功培养干细胞以后,以其为基础进行后续的DNA / RNA分离,文库制备和测序等各项实验,均获得了喜人的结果。
鸣谢:Ewart Kuijk et al. Nat Commun. 2020 May 19;11(1):2493.
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