细胞增殖检测MTT法|数据真实可靠
MTT 法又称 MTT 比色法,是一种检测细胞存活和生长的方法。该方法已广泛用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定等。它的特点是灵敏度高、经济。
MTT 全称为 3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di- phenytetrazoliumromide,商品名:噻唑蓝,是一种黄颜色的染料。
检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性 MTT 还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。二甲基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的甲瓒,用酶联免疫检测仪在 490nm 波长处测定其光吸收值,可间接反映活细胞数量。在一定细胞数范围内,MTT 结晶形成的量与细胞数成正比。
MTT 工作浓度为 5mg/ml。因此,可以称取 MTT 0.5 克,溶于 100 ml 的磷 酸缓冲液(PBS)或无酚红的培养基中,用 0.22μm 滤膜过滤以除去溶液里的细菌,放 -20℃ 避光保存即可。
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