质粒载体网NCI-N87[N87]人胃癌细胞
基本信息
服务名称：
质粒载体网NCI-N87[N87]人胃癌细胞
英文名称：
NCI-N87[N87]
参考报价：
服务商：
总点击数：
229
更新日期：
2022-10-08
服务类别：
服务详情
细胞名称NCI-N87[N87]（人胃癌细胞）
种属人
年龄（性别）男
组织来源胃癌
生长特性贴壁
细胞形态上皮细胞样
背景描述NCI-N87细胞表达表面糖蛋白癌胚抗原(CEA)和TAG72，并且没有左旋多巴胺脱羧酶(DDC)活性。NCI-N87细胞的血管活性的肠肽(VIP)受体活性极低并缺乏胃泌激素受体，它们表达蕈毒碱胆碱受体。没有证据表明，NCI-N87细胞存在N-myc、L-myc、myb和EGF受体基因的重组。NCI-N87细胞表达的c-myc和c-erb-B2 RNA水平与其它细胞株相当。以下基因NCI-N87细胞不表达：N-myc、L-myc、c-cis、IGF-2或胃泌激素释放肽。据报道，NCI-N87细胞的植板率为4.3%。
生长培养基RPMI-1640＋10%FBS＋1%P/S
培养条件气相：空气，95%；CO2，5%温度：37℃
NCI-N87[N87]人胃癌细胞培养步骤
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备基础培养基(GIBCO，，添加NaHCO3 1.5g/L，丙，酮酸钠0.11g/L)；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2）NCI-N87[N87]人胃癌细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。
智立中特（武汉）生物科技有限公司主要致力于质粒微生物资源的保护、共享和持续利用，围绕我国生命科学研究、生物技术创新和产业发展等重大需求，探索、发现、收集国内外的微生物资源，妥善长期保存管理；在保证生物安全和保护知识产权的前提下，为工农业生产、卫生健康、环境保护、科研教育提供质粒载体物物种资源、基因资源、信息资源和专业技术服务。旗下质粒载体网是一款提供质粒载体展示及定制的专业型网站，由智立中特（武汉）生物科技有限公司联合多家企业公司科研院校共同打造！主要展示了各种基因类型下的质粒载体！
种属人
年龄（性别）男
组织来源胃癌
生长特性贴壁
细胞形态上皮细胞样
背景描述NCI-N87细胞表达表面糖蛋白癌胚抗原(CEA)和TAG72，并且没有左旋多巴胺脱羧酶(DDC)活性。NCI-N87细胞的血管活性的肠肽(VIP)受体活性极低并缺乏胃泌激素受体，它们表达蕈毒碱胆碱受体。没有证据表明，NCI-N87细胞存在N-myc、L-myc、myb和EGF受体基因的重组。NCI-N87细胞表达的c-myc和c-erb-B2 RNA水平与其它细胞株相当。以下基因NCI-N87细胞不表达：N-myc、L-myc、c-cis、IGF-2或胃泌激素释放肽。据报道，NCI-N87细胞的植板率为4.3%。
生长培养基RPMI-1640＋10%FBS＋1%P/S
培养条件气相：空气，95%；CO2，5%温度：37℃
NCI-N87[N87]人胃癌细胞培养步骤
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备基础培养基(GIBCO，，添加NaHCO3 1.5g/L，丙，酮酸钠0.11g/L)；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2）NCI-N87[N87]人胃癌细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。
智立中特（武汉）生物科技有限公司主要致力于质粒微生物资源的保护、共享和持续利用，围绕我国生命科学研究、生物技术创新和产业发展等重大需求，探索、发现、收集国内外的微生物资源，妥善长期保存管理；在保证生物安全和保护知识产权的前提下，为工农业生产、卫生健康、环境保护、科研教育提供质粒载体物物种资源、基因资源、信息资源和专业技术服务。旗下质粒载体网是一款提供质粒载体展示及定制的专业型网站，由智立中特（武汉）生物科技有限公司联合多家企业公司科研院校共同打造！主要展示了各种基因类型下的质粒载体！
公司简介
智立中特（武汉）生物科技有限公司主要致力于质粒微生物资源的保护、共享和持续利用，围绕我国生命科学研究、生物技术创新和产业发展等重大需求，探索、发现、收集国内外的微生物资源，妥善长期保存管理；在保证生物安全和保护知识产权的前提下，为工农业生产、卫生健康、环境保护、科研教育提供质粒载体物物种资源、基因资源、信息资源和专业技术服务。旗下质粒载体网zlzt.com是一款提供质粒载体展示及定制的专业型网站，由智立中特（武汉）生物科技有限公司联合多家企业公司科研院校共同打造！主要展示了各种基因类型下的质粒载体！ 我们的工作主要包括：广泛分离、收集、保藏、交换和供应各类微生物质粒菌种；保存用于专利程序的各种可培养生物材料；质粒载体类保藏技术研究；微生物分离、培养技术研究；微生物鉴定和复核技术研究；保藏菌种的资料情报收集和提供及编辑微生物菌种目录。 目前保存各类载体资源超过20000余种 ，质粒微生物约5000株，另外我们还代理国外微生物菌种资源，如addgene，安捷伦，thermo，atcc等。
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