分子与细胞

慢病毒转染肿瘤类器官建立稳定转染株服务

基本信息
服务名称:
慢病毒转染肿瘤类器官建立稳定转染株服务
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151
更新日期:
2023-10-24
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服务详情

人源肿瘤类器官(Patient-derived organoids, PDO)在组织病理学、生物标志物与遗传特征、药理功能水平上保留了大部分原代肿瘤的特征、具有较好的临床相关性(Clinical relevance)。慢病毒(Lentivirus)载体是以HIV-1 (人类免疫缺陷Ⅰ型病毒)为基础发展起来的基因导入工具,是体内外实验研究中最常用的载体之一,可高效将外源性基因整合到宿主染色体中并介导目的序列稳定表达,目前被广泛应用到快速高效研究基因功能、筛选特异性药物靶点,构建特定基因表达降低的动物等。

图1: 慢病毒包装转染原理

图2: 慢病毒转染类器官实验流程

慢病毒稳转类器官优势
  1. 二维组织培养模型缺乏真实的复杂性,并且往往不能反映人类肿瘤生物学特征;
  2. 类器官培养保持细胞增殖和形态,具有与原肿瘤组织高度相似的生物学特征及遗传特性,更真实的模拟肿瘤微环境;
  3. 在此基础上研究特定靶基因,慢病稳转细胞系更接近疾病真实状况;
  4. 构建稳转靶基因肿瘤类器官后可在体外连续传代培养、冻存,便于开展科学研究。
真实实验数据
图3: realtime-PCR验证某基因在胰腺癌类器官稳定转染后RNA表达水平

             
             
图4: Westernblot验证某基因在胰腺癌类器官稳定转染后蛋白表达水平
 
                
               
          
图5: Westernblot验证利用CRISPR-cas9慢病毒转染后MYC基因敲除蛋白表达水平

[参考文献]

Y Maru, K Orihashi, Y Hippo, gastrointestinal physiology and diseases methods and protocols, 2016, Springer.

公司简介
北京科途医学科技有限公司在北京经济技术开发区和中科院湖州科创中心(全资子公司)有超2000平米的研发中心,包括临床医学检验所、GMP细胞生产车间、药理学平台及现代化细胞储存库,完成了数千万人民币的A轮融资,投资方包括德同资本、中关村发展集团、同晟资本。公司已取得中关村高新技术企业、国家高新技术企业、临床医学检验所执业许可证等证书及资质, 并获得2019年中关村国际前沿科技创新大赛医药健康领域Top10奖励。

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