透射电镜（TEM）
服务详情
概念
透射电子显微镜(Transmission Electron Microscope,简称TEM),可以看到在光学显微镜下无法看清的小于0.2um的细微结构，这些结构称为亚显微结构或超微结构。要想看清这些结构，就必须选择波长更短的光源，以提高显微镜的分辨率
原理
透射电子显微镜（transmission electron microscope，TEM）是利用阴极发射的电子，通过阳极中央的微孔形成的电子束穿透样品获得样品的电子信号，经物镜、中间镜和投影镜等多级电子放大至数百至数千万倍，最后成像在荧光屏上便可即时观察，或是投射到照相底片感光片上作为永久记录。目前TEM的分辨力可达0.2 nm。
由于标本必须置于高真空中进行电镜观察，所以电镜观察的生物标本必须特殊制备，不能含水，离体的生物标本要迅速加以固定，以防产生结构改变。另外，电子的穿透力很弱，这就需要把样品制成50 nm～100 nm厚的超薄切片（一个细胞切成100～200片）。为了使柔软的生物组织能够制成这样薄的切片，并使切片耐受高真空和电子轰击，所以在切片前要进行包埋。超薄切片技术是透射电镜观察成功的关键。
实验流程
取材及戊二醛固定→漂洗→锇酸固定→漂洗→丙酮梯度脱水→渗透→包埋→切片→双染色→电镜观察及拍照
实验结果
注意事项
取适量0.1mol/L PBS缓冲液清洗3次，每次10min。
后固定：1%锇酸固定，肾脏固定4min，其他组织固定1h。
取适量0.1mol/L PBS缓冲液清洗3次，每次10min。
透射电子显微镜(Transmission Electron Microscope,简称TEM),可以看到在光学显微镜下无法看清的小于0.2um的细微结构，这些结构称为亚显微结构或超微结构。要想看清这些结构，就必须选择波长更短的光源，以提高显微镜的分辨率
原理
透射电子显微镜（transmission electron microscope，TEM）是利用阴极发射的电子，通过阳极中央的微孔形成的电子束穿透样品获得样品的电子信号，经物镜、中间镜和投影镜等多级电子放大至数百至数千万倍，最后成像在荧光屏上便可即时观察，或是投射到照相底片感光片上作为永久记录。目前TEM的分辨力可达0.2 nm。
由于标本必须置于高真空中进行电镜观察，所以电镜观察的生物标本必须特殊制备，不能含水，离体的生物标本要迅速加以固定，以防产生结构改变。另外，电子的穿透力很弱，这就需要把样品制成50 nm～100 nm厚的超薄切片（一个细胞切成100～200片）。为了使柔软的生物组织能够制成这样薄的切片，并使切片耐受高真空和电子轰击，所以在切片前要进行包埋。超薄切片技术是透射电镜观察成功的关键。
实验流程
取材及戊二醛固定→漂洗→锇酸固定→漂洗→丙酮梯度脱水→渗透→包埋→切片→双染色→电镜观察及拍照
实验结果
注意事项
- 取材
- 快：实验标本在动物麻醉或处死后1~2分钟内取材、固定完毕；临床活检标本力争组织离体后1分钟内固定。固定液为预冷的2.5%缓冲戊二醛固定液。
- 小：电镜标本的标准大小为1mm3。取材时，可先取稍大组织，经稍许时间的预固定后，再改小。
- 利：切割组织时，需用锋利的手术刀片、双面刀片划取，避免揉割、牵拉和挤压组织，防止机械损伤。禁止使用剪刀剪切。
- 净：取材所用器皿，应事先清洗干净并烘干。
- 冷：取材可在常温下进行。如有条件最好在4℃低温下操作，以减少组织自溶。所用器械、容器及固定液均应预冷。
- 所取标本做好标记：瓶签上注明组别、编号等。
- 取材部位应准确：根据观察内容和实验目的，精准取材，如肿瘤取材时，应确保取到肿瘤实质，避免取肿瘤间质或出血、坏死部位。
- 固定
取适量0.1mol/L PBS缓冲液清洗3次，每次10min。
后固定：1%锇酸固定，肾脏固定4min，其他组织固定1h。
取适量0.1mol/L PBS缓冲液清洗3次，每次10min。
公司简介
武汉傲星生物科技有限公司是一家专注于为生命科学研究，医学研究，病理学研究，药物研究等提供基础科研技术服务和科研产品的生物技术服务公司。由武汉大学和华中科技大学医学博士团队创业组建。公司技术均为生命科学相关专业毕业，对科研具有独特的认知和情怀。可提供实验实施（病理学、分子生物学、免疫学、细胞生物学、动物模型、病毒包装等生物科研服务）、数据统计分析、论文翻译及润色修改，优秀硕博毕业生工作推荐等一体化全方位服务。擅长神经系统，糖尿病，皮肤病，内分泌等众多研究方向。旨在为广大科研工作者提供专业的科研解决方案和培训计划。
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