免疫与抗体

稳定细胞系构建

基本信息
服务名称:
稳定细胞系构建
英文名称:
Construction of stable cell lines
参考报价:
询价
总点击数:
379
更新日期:
2023-12-26
服务类别:

服务详情
服务简介

细胞转染,是将外源分子(如 DNA,RNA 等)导入真核细胞中的一种技术;

转染分为:瞬时转染和稳定转染

瞬时转染:指外源 DNA 或 RNA 转入宿主细胞后不整合到宿主染色体中进行外源目的基因的表达

稳定转染:指外源 DNA 转入宿主细胞后将外源目的基因整合到宿主染色体中进行表达

稳定转染的特点:

1. 目的基因整合到染色体上,需要使用线性 DNA(线性 DNA 虽然比超螺旋状的 DNA 转入量低,但整合率高)

2. 外源 DNA 整合到宿主细胞染色体中大约为 1%,通常需要通过一些选择性标记反复筛选,才能得到稳定转染的同源细胞系

3. 随宿主细胞基因组复制、转录、翻译,并被稳定遗传

4. 用于获得稳定表达的外源基因的单细胞克隆:如大规模蛋白质的合成,长期的药理学研究遗传机制的研究等

稳定细胞株:一般是将外源 DNA 克隆到具有某种抗性或者选择基因的载体上,载体被转染到宿主细胞并整合到染色体中,用载体中所含的选择标志进行筛选,筛选得到可稳定表达目的蛋白的细胞株

 

稳定细胞株构建流程

服务优势

高质:外源基因严格鉴定,细胞来源清晰,无污染

高产:重组蛋白 / 抗体表达量可快速优化至 2g/L 以上稳定表达

稳定:独有的 GS 稳转系列载体配合 MSX 药物筛选,实现稳定传代 15 代以上

快速:筛选高产细胞株,周期短至 3 个月

灵活定制:可针对重组蛋白 / 抗体全长或片段进行个性化表达

经验丰富:专业的技术团队,已成功为国内外多家医药公司和研究单位构建交付稳定细胞株

多筛选系统:G418/ 潮霉素 / 嘌呤霉素筛选系统,GS/DHFR 双基因筛选系统等

服务内容

服务项目

客户提供

服务内容

服务周期

交付内容

稳定细胞株构建

基因序列

载体

细胞

重组表达质粒构建

1周

1-3株细胞株

技术服务报告

药物本底浓度测定

1-2周

细胞转染

1天

多克隆稳定细胞株筛选及鉴定

2-3月

单克隆稳定细胞株筛选及鉴定

2月

稳转细胞株产量、活性检测及稳定性研究(可选)

/
案例展示

构建生产重组抗体的CHO稳定细胞株

稳定细胞株构建

公司简介
 

普健生物(武汉)科技有限公司于2012年在武汉成立,总面积4700平方米,办公室面积1700平方米,实验室面积3000平方米,其中GMP级别细胞房800平方米,配置一个100平方米的无菌、无内毒素纯化实验室;仪器设备投入超过千万元。作为武汉国家生物产业基地指定的光谷抗体发现与筛选公共服务平台,普健生物具备领先的技术实力和国际化发展的战略格局,专注于重组蛋白、抗体、诊断原料、抗体药物发现等自主技术平台的建设和下游生物医药产品的战略合作。

  公司立足于生命科学领域,自主建立生命科学研究平台、诊断原料开发平台、抗体药物研发平台,三大完善的技术服务平台:

  • 生命科学平台:拥有五大成熟高效的蛋白表达系统(哺乳动物细胞、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、酵母、昆虫细胞),可提供蛋白表达、分子构建-蛋白表达纯化-结构解析、抗体重组表达、鼠/兔单克隆抗体制备以及相关检测服务;
  • 诊断原料开发平台:拥有开放式全自动化学发光平台,可缩短研发周期、降低开发成本与技术风险,为广大客户提供各种诊断核心原料开发;
  • 抗体药物发现平台以Single B细胞抗体发现技术、杂交瘤筛选与噬菌体展示技术为主,目前已完成构建并对外提供抗体筛选技术服务的文库有:新冠特异性抗体噬菌体文库、羊驼天然纳米抗体噬菌体文库、兔源天然抗体噬菌体文库、小鼠天然抗体噬菌体文库、另外可为客户提供鼠/兔/鸡/猪/猫/狗等物种免疫噬菌体抗体文库构建及筛选服务。

  同时也开发了大量的重组蛋白、抗体、工具酶、药物对照抗体、工业酶、诊断原料等相关产品。

  目前已拥有的自主技术包括:哺乳动物细胞高密度表达系统、MHC多肽复合物表达技术、多聚体定向表达技术、杂交瘤鼠单抗制备技术、single B细胞抗体发现技术、生产型稳定细胞株构建、噬菌体文库的构建以及淘选、抗体工程化(抗体人源化、亲和力成熟、双特异性抗体制备技术)等等。截止目前已成功交付数万例与重组蛋白、抗体相关的技术委托研发,客户以及合作伙伴涵盖了国内外顶尖的学术研究机构以及制药公司;并且与FIND(创新诊断基金会)、BAYER(拜耳作物科学)、滨会生物、广州呼吸健康研究院建立合作关系;与青岛大学附属医院医学研究转化中心、苏州系统医学研究所、广州再生医学与健康广东省实验室建立战略合作关系。


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