产品描述

本产品为LabEx提供的基于邻近连接分析（Proximity Ligation Assay, PLA）技术的可视化蛋白相互作用检测服务，规格为12孔板。PLA技术是一种高特异性、高灵敏度的蛋白互作检测方法，能够在细胞或组织样本中原位检测内源性蛋白的相互作用、修饰和定位，并以离散的荧光点状信号呈现，每个亮点代表一对相互作用的蛋白分子或单个蛋白的修饰事件。

该服务利用两种特异性抗体分别识别目标蛋白或同一蛋白的不同修饰状态，抗体偶联的寡核苷酸探针在空间距离足够近时（通常<40 nm）通过连接酶形成可扩增的环状DNA模板，随后通过滚环扩增（RCA）实现信号放大，再经荧光标记探针杂交产生清晰的点状荧光信号。本服务适用于细胞涂片、细胞爬片及组织切片等多种样本类型。

产品规格

• 服务形式：PLA蛋白相互作用检测服务

• 规格：12孔板

• 检测原理：邻近连接分析（PLA）

• 信号放大方式：滚环扩增（RCA）

• 信号检测：荧光标记探针杂交，产生离散点状荧光信号

• 适用样本：细胞涂片、细胞爬片、组织切片

• 交付周期：需咨询

• 价格：¥2,000.00

应用建议

本检测服务适用于蛋白互作和修饰研究，常见应用场景包括但不限于：

• 蛋白质相互作用验证：在细胞或组织原位验证两种目标蛋白之间的直接或间接相互作用。

• 蛋白质修饰检测：检测特定蛋白的磷酸化、乙酰化、泛素化等翻译后修饰，使用同一目标蛋白的两种不同修饰特异性抗体进行PLA检测。

• 蛋白质定位分析：研究蛋白在特定亚细胞结构（如细胞核、细胞膜、突触等）中的定位和分布。

• 低丰度蛋白检测：利用PLA的高灵敏度优势，检测传统免疫荧光法难以捕捉的弱表达蛋白。

背景信息

邻近连接分析（Proximity Ligation Assay, PLA）是一种基于抗体识别的蛋白检测和互作研究技术，由瑞典Olink Bioscience公司（现为Navinci Diagnostics）开发。PLA技术的核心原理是将免疫学的高特异性与分子生物学的高灵敏度信号扩增相结合，突破了传统免疫共沉淀（Co-IP）和免疫荧光（IF）在空间分辨率或灵敏度上的限制。

PLA实验流程的关键步骤包括：首先，两种一抗分别结合目标蛋白（可以是同一种蛋白的不同表位或两种不同蛋白）。其次，Navenibody（偶联了专有寡核苷酸臂的二抗）与各自的一抗结合。当两个目标蛋白的间距足够近时，偶联的寡核苷酸臂相互靠近，通过连接酶作用形成环状DNA模板。随后，聚合酶启动滚环扩增反应，产生长链重复序列的DNA产物。最后，荧光标记的互补探针杂交至扩增产物上，产生可被荧光显微镜清晰分辨的离散点状信号。

PLA技术能够在保持细胞或组织形态结构完整性的前提下，实现单分子水平的蛋白检测和空间定位，是传统免疫荧光、Western Blot和Co-IP等技术的有效补充。该服务为研究蛋白复合物组装、信号转导动态调控及疾病相关蛋白异常修饰提供了有力工具。

保存条件

• 本产品为定制化检测服务，非实体试剂，因此不适用常规保存条件。

• 样本的采集、固定、运输与保存需严格遵循服务提供方的指导说明。建议新鲜制备的样本（如细胞爬片、组织切片）按推荐方法固定后，于适当条件下运输。

​技术平台介绍