PLA可视化蛋白互作服务(6孔板)
产品描述
本产品为LabEx提供的基于邻近连接分析(Proximity Ligation Assay, PLA)技术的可视化蛋白互作检测服务,规格为6孔板。PLA技术是一种高特异性、高灵敏度的蛋白相互作用检测方法,能够实现对细胞内或组织切片中内源性蛋白互作、蛋白修饰及蛋白定位的精准可视化分析。
该服务利用特异性抗体识别靶蛋白,通过抗体偶联的寡核苷酸链引导连接反应实现信号放大。当两个靶蛋白发生相互作用且空间距离足够近时,抗体偶联的寡核苷酸在连接酶作用下形成可扩增的DNA片段,最终通过荧光标记探针杂交产生离散点状荧光信号,每个信号点代表一对相互作用的蛋白分子。本服务仅限研究用途,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗。
产品规格
服务类型:PLA可视化蛋白互作检测服务
规格:6孔板
检测原理:邻近连接分析(PLA)
信号形式:离散点状荧光信号(每个亮点代表一对互作蛋白分子)
应用建议
本服务适用于蛋白质相互作用研究,常见应用场景包括但不限于:
蛋白相互作用验证:用于验证已知或预测的蛋白-蛋白相互作用,提供原位结合的直接证据。
蛋白修饰检测:用于检测特定蛋白的翻译后修饰(如磷酸化、乙酰化、泛素化等)及其动态变化。
亚细胞定位分析:用于研究目标蛋白在特定亚细胞结构中的定位及相互作用网络。
药物靶点研究:用于评估药物对靶蛋白结合状态或互作网络的影响。
背景信息
邻近连接分析(Proximity Ligation Assay, PLA)是一种基于抗体识别和DNA连接扩增的高特异性蛋白检测技术。其核心原理是利用一对特异性抗体分别识别目标蛋白(可以是同一种蛋白的两种修饰形式,也可以是两种不同的相互作用蛋白)。当这两个蛋白间的距离小于40纳米时,偶联在抗体上的寡核苷酸探针得以在连接酶作用下连接成环状DNA模板,随后通过滚环扩增产生局部放大的信号,最后用荧光标记的互补探针杂交,形成可被显微成像的离散信号点。
PLA技术的优势在于其高灵敏度和高特异性:每个荧光信号点代表单个分子对,可在单分子水平上对目标分子进行计数和定量分析;同时,由于信号产生依赖于两个探针的邻近结合,非特异性背景被显著抑制。与传统的免疫共沉淀或荧光共振能量转移技术相比,PLA无需蛋白提取或基因改造,可在细胞或组织原位检测内源性蛋白,保留了完整的细胞结构和生理环境,是研究蛋白互作网络的有力工具。
保存条件
本产品为定制化检测服务,非实体试剂,因此不适用常规保存条件。
样本的采集、运输与保存需严格遵循服务提供方的指导说明。建议新鲜制备的样本(如细胞爬片、组织切片)尽快进行固定处理,若需运输或短期保存,应置于适当的固定液或保存液中,避免干燥和反复冻融。
邻近连接分析(Proximity Ligation Assay, PLA):一种基于抗体特异性识别靶蛋白、通过抗体偶联寡核苷酸链引导连接反应实现信号放大的蛋白互作检测技术。其核心原理是当两个靶蛋白发生相互作用且距离足够近时,抗体偶联的寡核苷酸可通过连接酶形成可扩增的 DNA 片段,最终通过荧光标记探针杂交产生离散点状荧光信号(每个亮点代表一对相互作用的蛋白分子)。

可视化蛋白互作(PLA)实验流程

抗体-A+抗体-B结合目标蛋白 → DNA探针靠近 → 连接 → 扩增 → 信号检测
1) 封闭样本
2) 一抗孵育: 两种一抗分别与位于一种蛋白质或两种邻近蛋白质上的目标表位结合
3) Navenibody孵育: Navenibodies(与专有寡核苷酸臂结合的精选抗体)与各自的一抗结合
4) DNA circle形成: 当 Navenibodies 靠近时 , 附着的寡聚物能形成 DNA circle ,通过减少非特异性背景染色来保证高特异性5) 扩增和检测 :加入聚合酶后 , 就会启动 滚环循环扩增过程。 标记的探针与扩增的 DNA结合 , 显色形成亮点
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详细地址:
上海浦东新区古丹路15弄18号4楼
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