PLA可视化蛋白互作服务(组织芯片)
产品描述
本产品为LabEx提供的基于邻近连接分析(Proximity Ligation Assay, PLA)技术的可视化蛋白相互作用检测服务,专为组织芯片样本设计。PLA技术是一种高特异性、高灵敏度的蛋白互作原位检测方法,能够在组织切片上实现单个蛋白相互作用事件的可视化分析。
该服务利用一对特异性抗体分别识别两个目标蛋白,通过偶联的寡核苷酸探针在近距离发生连接反应,经滚环扩增后产生离散的荧光点状信号。每个荧光点代表一个独立的蛋白相互作用事件,实现蛋白互作的单分子水平检测与空间定位分析。本服务仅限研究用途,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗。
产品规格
服务名称:PLA可视化蛋白互作服务(组织芯片)
检测原理:邻近连接分析(Proximity Ligation Assay, PLA)
样本类型:组织芯片
交付形式:荧光染色后的组织芯片及检测报告
应用建议
本服务适用于组织水平蛋白互作研究,常见应用包括但不限于:
蛋白互作原位验证:在组织微环境中验证特定蛋白对(如受体-配体、酶-底物、转录因子复合物)的相互作用。
组织微环境研究:研究肿瘤、炎症或神经退行性疾病组织中蛋白互作的细胞类型特异性和空间分布特征。
生物标志物发现:筛选和验证疾病状态下特异性变化的蛋白互作事件作为诊断或预后标志物。
药物靶点验证:评估药物处理后靶点蛋白与下游效应蛋白的相互作用变化。
背景信息
邻近连接分析(Proximity Ligation Assay, PLA)是一种基于免疫学原理的蛋白互作检测技术,能够在细胞或组织原位上实现对蛋白相互作用的可视化检测。该技术的核心原理是:当两个靶蛋白在空间上足够接近(通常小于40 nm)时,分别结合于这两个蛋白的特异性抗体所偶联的寡核苷酸探针能够通过连接酶形成可扩增的DNA模板。
PLA技术结合了免疫学的高特异性和分子生物学的高灵敏度两大优势。与传统蛋白互作检测方法(如免疫共沉淀、酵母双杂交)相比,PLA具有独特的技术特点:能够在保持组织形态结构的条件下进行检测,提供蛋白互作的亚细胞定位信息;能够实现单分子水平的检测灵敏度,可在低丰度样本中检测到弱或瞬时的互作事件;能够进行定量分析,通过计数荧光点数反映蛋白互作强度。
本服务将PLA技术应用于组织芯片平台,能够实现多组织样本在高通量条件下的蛋白互作分析,为组织微环境研究和转化医学探索提供有力工具。
保存条件
本产品为检测服务,非实体试剂,因此不适用常规保存条件。
样本的采集、运输与保存需严格遵循服务提供方的指导说明。建议组织样本采集后及时固定(如4%多聚甲醛),并按照要求进行石蜡包埋或冰冻保存。
邻近连接分析(Proximity Ligation Assay, PLA):一种基于抗体特异性识别靶蛋白、通过抗体偶联寡核苷酸链引导连接反应实现信号放大的蛋白互作检测技术。其核心原理是当两个靶蛋白发生相互作用且距离足够近时,抗体偶联的寡核苷酸可通过连接酶形成可扩增的 DNA 片段,最终通过荧光标记探针杂交产生离散点状荧光信号(每个亮点代表一对相互作用的蛋白分子)。

可视化蛋白互作(PLA)实验流程

抗体-A+抗体-B结合目标蛋白 → DNA探针靠近 → 连接 → 扩增 → 信号检测
1) 封闭样本
2) 一抗孵育: 两种一抗分别与位于一种蛋白质或两种邻近蛋白质上的目标表位结合
3) Navenibody孵育: Navenibodies(与专有寡核苷酸臂结合的精选抗体)与各自的一抗结合
4) DNA circle形成: 当 Navenibodies 靠近时 , 附着的寡聚物能形成 DNA circle ,通过减少非特异性背景染色来保证高特异性5) 扩增和检测 :加入聚合酶后 , 就会启动 滚环循环扩增过程。 标记的探针与扩增的 DNA结合 , 显色形成亮点
详情点击→ https://www.u-labex.com/detail-lxplam00-1.html?mk_channel=SWQC
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上海浦东新区古丹路15弄18号4楼
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