分子与细胞

细胞转染技术服务

基本信息
服务名称:
细胞转染技术服务
英文名称:
细胞转染技术服务
参考报价:
总点击数:
1557
更新日期:
2009-09-15
服务类别:

服务详情
细胞转染技术服务
    常规转染技术可分为两大类,一类是瞬时转染,一类是稳定转染(永久转染)。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色体中,因此一个宿主细胞中可存在多个拷贝数,产生高水平的表达,但通常只持续几天,多用于启动子和其它调控元件的分析。一般来说,超螺旋质粒DNA转染效率较高,在转染后24-72小时内(依赖于各种不同的构建)分析结果,常常用到一些报告系统如荧光蛋白,β半乳糖苷酶等来帮助检测。后者也称稳定转染,外源DNA既可以整合到宿主染色体中,也可能作为一种游离体(episome)存在。尽管线性DNA比超螺旋DNA转入量低但整合率高。外源DNA整合到染色体中概率很小,大约1/104转染细胞能整合,通常需要通过一些选择性标记,如来氨丙基转移酶(APH;新霉素抗性基因),潮霉素B磷酸转移酶(HPH),胸苷激酶(TK)等反复筛选,得到稳定转染的同源细胞系。

    转染技术的选择对转染结果影响也很大,许多转染方法需要优化DNA与转染试剂比例,细胞数量,培养及检测时间等。一些传统的转染技术,如DEAE右旋糖苷法,磷酸钙法,电穿孔法,脂质体法各有利弊,其主要原理及应用特点见下表:

 转染方法  原理  应用  特点
 磷酸钙法  磷酸钙DNA复合物吸附细胞膜被细胞内吞  稳定转染、瞬时性转染  不适用于原代细胞 
 操作简便但重复性差
 有些细胞不适用
 DEAE-右旋糖苷法  带正电的DEAE-右旋糖苷与核酸带负电的磷酸骨架相互作用形成的复合物被细胞内吞  瞬时性转染  相对简便、结果可重复 
 但对细胞有一定的毒副作用
 转染时需除血清
 电穿孔法  高脉冲电压破坏细胞膜电位,DNA通过膜上形成的小孔导入  稳定转染、瞬时性转染、所有细胞  适用性广但细胞致死率高,DNA和细胞用量大, 需根据不同细胞类型优化电穿孔实验条件
 病毒介导法  通过侵染宿主细胞将外源基因整合到染色体中  稳定转染  可用于难转染的细胞、原代细胞,体内细胞等
 逆转录病毒    特定宿主细胞  但携带基因不能太大细胞需处分裂期 
 需考虑安全因素
 腺病毒  通过侵染宿主细胞将外源基因整合到染色体中  瞬时转染  特定宿主细胞 
 可用于难转染的细胞 
 需考虑安全因素
 阳离子脂质体法  带正电的脂质体与核酸带负电的磷酸基团形成复合物被细胞内吞  稳定转染、瞬时性转染、所有细胞  适用性广,转染效率高,重复性好,但转染时需除血清。
 转染效果随细胞类型变化大
 Biolistic颗粒传递法  将DNA用显微重金属颗粒沉淀,再将包被好的颗粒用弹道装置投射入细胞,DNA在胞内逐步释放,表达  瞬时性转染  可用于:人的表皮细胞,纤维原细胞,淋巴细胞系以及原代细胞
 显微注射法  用显微操作将DNA直接注入靶细胞核 稳定转染  瞬时性转染  转染细胞数有限 
 多用于工程改造或转基因动物的胚胎细胞

    SUNBIO实验中心多年来积累了丰富的细胞转染技术经验,根据客户细胞及转染目的的不同,可为客户提供最适合客户的转染试剂,如SuperFect Transfection Reagent,Effectene Transfection Reagent,RNA iFectTM,FuGENE HD Transfection Reagent,Lipofectamine2000等。
公司简介

尚柏生物医学技术(北京)有限公司创建于2000年,已经获得国家经营三类医疗器械许可(证号:京081876)和北京市科学技术委员会认定的高新技术企业(统一编号:0611008A21672)。公司总部位于高校云集的北京市海淀区中关村科技园区,座落于中国铁路建设总公司铁建医院。与军事医学科学院、301医院、305医院等国内外知名的科研单位和医院紧密为邻。2007年7月11日,SUNBIO正式被北京中医药大学授权为"国家基础医学与生命科学人才培养实训基地",SUNB IO不断积累和总结实习带教经验,使学生的理论知识和人生阅历通过SUNBIO这个平台得到实践和丰富。SUNBIO将不断加强实训基地的基础设施和人才队伍的建设,逐步完善实习教学模式,争取成为更多基础医学、生命科学教学示范单位的人才培养基地。

尚柏生物致力于尖端免疫学和分子生物学技术在科研中的应用与推广,专业从事免疫检测及其他相关产品的引进、服务和研发。目前已经拥有自主知识产权专利产品6项。尚柏生物公司是一家深受客户信任的高质量服务供应商,通过高度细分、全方位的服务平台,向生物制药和医疗仪器公司提供生物医学产品测试,合同研究及开发,以及生物 cGMP 生产服务。

SUNBIO生命科学实验中心作为尚柏生物的核心技术平台,由加拿大籍华人投资人民币800万元,拥有专业的实验室、洁净的动物房和一流的实验设备(实验室总面积达200平方米拥有仪器设备20余台,较大型仪器设备有:荧光定量PCR仪器、CO2培养箱、超低温冰箱、荧光显微镜、高速冷冻离心机、PCR仪、垂直电泳仪、自动生化分析仪、紫外分光光度计、酶标仪、超净工作台等)和经验丰富的技术人员,其中助理研究员(博士)4人,实验师(硕士)12人,已经发表的SCI文章6篇,国家核心期刊文章20余篇,完整的实验记录多达5000多份。科研项目涵盖临床医学、免疫学、细胞生物学、分子生物学等生命科学诸多领域,具体的实验方法有:普通PCR、荧光定量PCR(real-time PCR)、Western印迹、流式、ELISA、免疫组化、细胞培养、MTT、放免、实验动物饲养及造模等。同时本实验室人员有丰富的新药研发企业工作经验,能够承担新药药效学及毒理学实验,提供新药申报资料、文献查询及综述内容的整理服务。

SUNBIO生命科学翻译中心作为尚柏生物旗下全资子公司,专门从事医学、医药类口笔译的专业化翻译公司长期以来,SUNBIO翻译中心为卫生部、药品监督管理局下属多家单位及多家著名跨国医药企业提供口、笔译服务,获得一致好评。SUNBIO翻译中心以国内知名医科、药科院校,科研院、研究所翻译专家、教授,医学博士,药学博士及外籍(美、英、德、日、韩等)专家为主要依托,云集国内中西医专业翻译人才,以及国外留学回国人员,致力于国内外中西医基础理论、医疗、制药、生物技术、医疗器械、化妆品、食品卫生、兽医等医药相关行业的专业化翻译服务。SUNBIO翻译中心可提供英、日、韩、法、德、俄、意、西班牙等十余种语言的口译、笔译服务。SUNBIO翻译中心坚持奉行“专业、严谨、快捷”的宗旨,凭借装备精良的专业化翻译队伍,以SUNBIO严谨的作风,为客户提供快捷、足不出户的翻译产品和服务。SUNBIO翻译中心视质量为企业生存之根,效率为生存之本,按照GB/T19002-1994 idt IS9002:1994 标准的要求,建 立了先进的质量管理体系和内部管理制度,并全面运用全球最先进的塔多思(TRADOS)翻译记忆软件,以及Freehand、Pagemaker、CorelDraw等制图排版软件,竭诚为海内外广大客户提供最佳的专业化翻译产品和高品质的翻译服务。

公司充分依托装备精良的研究平台,结合自身的技术优势和精良的人力资源,始终不懈的跟踪生命科学领域发展的最前沿。目前,公司承担众多科研院校的国家863、973等科研项目的技术服务,通过我们的高效服务,全国众多客户在EJP, JBC等杂志上发表了影响因子较高的SCI论文。协助近百名研究生进行科研选题和课题合作服务,这些研究生在毕业答辩时都获得了答辩组专家好评,其中一位已获得全国优秀博士论文荣誉。

我们所做的一切都是为了使您的工作更轻松、更快捷。良知使我们不断拿出和引进更好的产品,控制和降低各种成本,为您的研究加油,加速我国自有成果的开发,最终摆脱对进口产品的依赖。这是一项长期艰苦的工作,这是一项光荣伟大的工作,这是我们继续发展的动力。


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