全长鸟枪法测序
全长鸟枪法测序 |
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全基因组测序主要有二种策略,一种是分级鸟枪法测序,另一种是全基因组鸟枪法测序.微生物是一种十分重要的遗传资源,运用全基因组鸟枪法可以方便、快捷地完成其基因组的测序任务.。 信利来公司拥有ABI3730xl测序平台和齐全的配套设施，其全基因组鸟枪法测序（Whole Genome Shotgun Sequencing），无需构建各类复杂的物理图谱和遗传图谱，采用最经济有效的实验设计方案，直接将整个基因组打成不同大小的DNA片段构建Shotgun文库，对文库进行随机测序，最后运用生物信息学方法将测序片段拼接成全基因组序列。信利来公司测序平台目前已经完成十余例50kb到500kb大小基因组测序服务项目，积累了丰富的经验。 全基因组鸟枪法测序的主要步骤是：第一，建立高度随机、插入片段大小为1.6kb到4kb左右的基因组文库。克隆数要达到一定数量，即经过两端测序的克隆片段的碱基总数应达到基因组大小的6到10倍。第二，高效、大规模的克隆双向测序。第三，序列拼装。借助Phred, Phrap, Consed 软件进行序列组装，产生一定数量的contig。第四，填补缺口。有两种待填补的缺口，一是没有相应模板DNA的物理缺口，我们通过PCR的方法进行填补；二是有模板DNA但未测到的序列缺口。我们直接在模板DNA上设计引物测序。 项目适用范围
服务内容
样品要求 动物、植物、微生物组织请提供足量的新鲜样品（4℃保存，不超过一天）或将新鲜样品立即存于液氮或-80℃，一周内寄样。 已纯化 DNA要求浓度＞10ng/ul ，最小量＞20ug，OD 260 /OD 280值：1.80～2.00 服务费用
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