cDNA文库构建/EST测序分析
诺赛为客户提供高通量、快速优质的EST测序服务,同时还建立了成熟的cDNA文库构建平台,可进行多种cDNA文库构建,为EST研究提供全方位服务。
特点:
Ø 我们拥有成熟的实验方法和丰富的文库建库经验,在cDNA合成、酶切、连接及转化等方面拥有成熟的技术和文库构建经验丰富的专业人员,建成的文库全长cDNA比例高,可用于大规模基因测序和目的基因的筛选。
Ø 构建的为质粒文库,可选择的载体有pCMV.SPORT6(真核表达载体)和pSPORT 1原核表达载体
服务流程:
Ø 阶段1:反转录酶催化合成cDNA第一链
Ø 阶段2:cDNA第二链的合成
Ø 阶段3:cDNA的甲基化
Ø 阶段4:接头或衔接子的连接
Ø 阶段5:凝胶过滤法分离cDNA
Ø 阶段6:cDNA与载体臂的连接
客户提供:
Ø 请提供尽量多的新鲜材料:
a.如果实验材料为动物组织材料,样品量需大于5g
b.如果实验材料为植物组织材料,样品量需大于20g
c.如果实验材料为各种培养细胞,请提供5×10^7以上培养好的细胞。
Ø 客户也可以直接提供Total RNA,但要保证没有降解,需要温育后(37℃,1-2小时)通过电泳等方法进行判断,其纯度要求A260/280≥1.8,样品总量大于250μg。
提交结果:
Ø 实验完成后,我们将提供完整的实验报告,构建好的cDNA文库库容量为106。
Ø 在连接克隆cDNA片段时,进行了cDNA片段的长度筛选,基本上去除了400bp以下的cDNA小片段,保证了较长cDNA片段的克隆效率,克隆载体一般为pcDNA3.1,也可以为客户提供的其它载体。
Ø 我们可以对构建好的文库提供后续如克隆保菌、PCR扩增、大量测序等服务,需另行收费。
提供服务:
Ø cDNA文库构建,大规模测序,数据信息处理及分析
北京诺赛基因组研究中心有限公司(诺赛基因)是基于基因组学研究的生物高科技企业,公司的发展目标是实现最新生物医药研究成果的产业化。诺赛基因致力于自有知识产权的创新药物的开发,生物标志的鉴定与疾病诊断/预警检测技术的研发,生物制品与试剂的生产,中国人群遗传资源和临床资源的收集、保护、利用与开发,以及生物科技领域相关技术的培训、咨询和服务。
1998年9月,北京诺赛基因组研究中心有限公司由北京生物技术和新医药产业促进中心和北京博大科技投资开发有限公司投资,中国医学科学院/中国协和医科大学、北京大学、中国科学院、军事医学科学院等单位参与组建成立。
诺赛基因开展与人类疾病相关的基因组学、功能基因组学和蛋白质组学研究。1998年10月,国家科技部批准在诺赛基因的基础上成立国家人类基因组北方研究中心,作为国家级研究基地。
诺赛基因自成立以来,整合以北京为中心的科研院所以及临床医院在基因组学及相关领域的科研力量,建立了具有世界级水平的生物学研究实验室,组建了包括8位院士在内的、由26位生物和医药领域资深科学家组成的智囊团,组织并培养了一支由近百名科技人员组成的具有丰富研发经验的科研团队。
诺赛基因现已成功完成和正在进行863、973等国家重点课题及合作项目74项,参与并完成了1%国际人类基因组测序项目,承担了致病微生物基因组测序、中国人群单核苷酸多态性(SNP)检测及疾病基因组学研究等多项国家科研项目。截止目前,诺赛基因已申请专利28族。
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