甲基化检测
采用甲基化特异性PCR(MSP)进行甲基化检测,MSP原理为:双链DNA变性解链后,在HSO3-作用下发生C→U转化,C若已有甲基化则无此改变;甲基化修饰只发生于5′→3′方向C-G相联结构的C上,因此在HSO3-作用后,DNA CpG岛若无甲基化,则序列中的改变为C→U,CG→UG,若有甲基化则不变,用不同的引物做PCR,即可检测出这种差异,从而确定基因有无CpG岛甲基化。
优点:1.避免了使用限制性内切酶及其后续相关问题;2.敏感性高;可用于石蜡包埋样本。
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广州天河区科学城国际企业孵化器
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