蛋白质组label-free
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声明:案例为本公司实际操作案例。为保护客户的权益与保密协议,在保证实验结果真实有效的前提下,我们对实验的数据进行了适当的变动处理,欢迎用户来我公司参观及考证结果真实性。请勿转载!责任自负!
一、样品处理
1、8个样品冻干,加入TFA水溶液从溶。
2、取8个C18脱盐柱分别加入100%乙jing离心。再加入TFA 离心。
3、8个C18脱盐柱分别加入从溶的样品,离心1min反复上样3次。
4、分别加入洗脱液离心1min,并收集离心后的洗脱液冻干。
5、将冻干后样品加入A液从溶后离心2min,取上清定量。
6、分别取相同的量进行质谱检测
二、肽图质谱检测
检测条件
液相:EASY-nLC1200
色谱条件:色谱柱:Dionex C18 PePMap300, 1.9um, 120Å; ID 150um, length 12cm。
流速:略
洗脱条件:
time | 0 | 8 | 24 | 60 | 79 | 80 85 86 90 |
%B | 5 | 5 | 13 | 28 | 40 | 95 95 6 6 |
质谱仪:QE
质谱条件:数据采集时间:78min, 喷雾电压 (spray voltage):2.0KV; 毛细管温度(caplillary temperature):320℃; 碰撞能量(normalized collision energy):27%, 采集质量范围:300-1400 Da。
CK_TIC
CK__BPC
单个样品重复3次
比较组间有统计意义的差异蛋白。
西农生(北京)生物技术有限公司是开展蛋白质组技术专业服务的生物技术公司,搭建了以Amersham的高通量双向电泳系统和Bruker公司最先进的autoflex II TOF/TOF质谱系统为基础的,配以样品处理及蛋白质数据分析为辅的蛋白质技术平台,提供从样品处理到2D胶,直到质谱鉴定及数据分析的全流程服务。
公司拥有样品前处理实验室及二维电泳实验室,质谱(bruker autoflex II TOF/TOF)实验室等,工作由具有蛋白组技术经验的技术人员完成,主要员工均具有硕士以上学历,多年从事蛋白技术实践经验.公司已与全国多家医院,高校及科研院所开展了及正在开展蛋白质组课题的合作。
客户名单如下:
医院:北医三院,解放军309医院,北京朝阳医院,四川大学华西医院,昆明延安医院等。
高校:中国农业大学,北京农学院,北京林业大学,河南农业大学,内蒙古农业大学,青海大学,重庆医科大学,新疆医科大学等。
科研院所:中科院遗传与发育所,中科院海洋所,中科院农业资源中心,中国林业科学研究院,医科院药植所,医科院病原所,中国CDC营养所,山东省农科院等。
详情请登陆http://www.scilongs.com 有案例
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