RNA pull down技术服务
先将体外转录的RNA结合到Beads上,再将RNA-Beads和细胞裂解液孵育,这样与目标RNA结合的蛋白便会一起吸附在Beads上。洗涤掉不结合的蛋白后,用洗脱液将RNA-protein复合物从Beads洗脱下来,之后可以采用Western Blot技术检测特定的结合蛋白,还可以采用质谱方法鉴定与目标RNA结合的未知蛋白。
RNA pull down实验流程-辉骏生物
RNA pull down应用背景
RNA结合蛋白(RNA binding protein,RBP)是一类功能强大而广泛的调节因子,约占细胞编码的所有蛋白的5%~10%。目前除了少数RNA以核酶形式单独发挥功能,大部分RNA通过与蛋白结合形成RNA-蛋白复合物来发挥作用。
一方面,RBP参与RNA合成、可变剪接、修饰、转运、翻译及胞内定位等多个转录后调控过程,调控mRNA稳定性、lncRNA活性、miRNA沉默复合体形成等生物学过程;另一方面,RNA也会调节这些蛋白质的活性、定位或与其他蛋白质相互作用,从而影响RBP介导的各种细胞事件。RNA与蛋白质的相互作用对于维持细胞稳态是非常重要的,干扰这种相互作用将会导致细胞功能失调和相关疾病的发生。
目前研究RNA-蛋白质相互作用的方法分为两大类:一是以感兴趣的RNA为中心,寻找与该RNA结合的蛋白质;二是以感兴趣的蛋白质为中心,寻找与该蛋白质结合的RNA。RNA pull down属于前者,通过体外转录的方式将感兴趣的RNA带上标签,通过该标签使RNA结合到树脂支持物上,再加入样本蛋白质与RNA结合,洗涤、洗脱得到与目标RNA结合的蛋白质。
研究背景
研究者们通过大量临床样本的检测发现,一个长链非编码RNA(LncRNA)“LAMP5-AS1”在混合系白血病(MLL)中高表达,因此进一步探索了LAMP5-AS1在MLL白血病发生发展中的作用。
研究路线
lncRNA LAMP5-AS1在MLL白血病细胞的自我更新过程和分化阻滞中起着重要的作用。LAMP5-AS1对维持DOT1L酶在MLL白血病中的高活性具有重要意义,可能成为治疗MLL白血病的一个有价值的靶点。
RNA pulldown技术实验-辉骏生物客户文献
Wang W.T. et al: The lncRNA LAMP5-AS1 drives leukemia cell stemness by directly modulating DOT1L methyltransferase activity in MLL leukemia. Journal of Hematology & Oncology. 2020. (IF=17.388)
广州辉骏生物科技股份有限公司(原“广州辉骏生物科技有限公司”)成立于2008年,是一家为科研机构提供实验技术的专业公司,尤其擅长于蛋白质组学和分子生物学等技术。经过10多的不断努力与开拓进取,随着公司规模不断扩大,总部已经成功入驻广州黄埔区科学城国家级科技企业孵化器。
经过10多的不断努力与开拓进取,辉骏生物已经拥有一支经验丰富、优秀刻苦的蛋白质组学实验及蛋白核酸互作技术队伍。公司各类实验的技术人员均有着深厚的理论基础和丰富的实验经验。本公司秉承着严谨科学、优质高效、不断完善的服务理念,以蛋白质组学为中心,函括各类蛋白核酸互作、分子生物学、抗体测序等实验。面向生物医药企业、院校、科研机构、医院和个人,为生物医药研发、生命科学和医学研究提供全方位蛋白质组学实验解决方案。目前,我们已经与中科院华南植物研究所、广州肿瘤医院、中山大学、浙江大学、武汉大学、上海海洋大学、西南大学、厦门大学等全国60多家科研单位建立了广泛的项目合作。
感谢多年来广大客户对辉骏生物的支持与信任,我们将一如既往地为大家提供优质、高效、精准的各类包括蛋白质组学、核酸蛋白互作、分子\细胞生物学、免疫沉淀试剂盒、抗体测序等着方面实验技术服务。本着客户至上的理念,辉骏生物科技的所有员工将竭诚为您服务,按时按质地向您提供各类实验报告。
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