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肌肉、大脑、幼虫器官案例揭秘临界点干燥在显微CT成像中的作用

基本信息
服务名称:
肌肉、大脑、幼虫器官案例揭秘临界点干燥在显微CT成像中的作用
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74
更新日期:
2026-05-16
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摘要     
显微CT在生物软组织成像中常面临对比度不足的问题,临界点干燥是提升图像质量的关键前处理步骤。本文系统介绍该技术的操作流程,并结合昆虫肌肉、脑部及幼虫器官三大案例,为相关领域研究者提供可复用的实验方案。
   
显微CT成像的挑战与突破     
传统的显微CT成像对骨骼、牙齿等高密度结构表现出色,但对于软组织结构,由于低原子序数元素的弱吸收特性,成像对比度常不理想。临界点干燥技术通过温和去除样本中的液体,最大程度减少组织收缩与变形,显著提升信噪比,是获取高质量三维重建数据的必备步骤。
 
三大案例展示临界点干燥的实际应用         
案例一:书蝎肌肉系统显微CT成像方法 
                    
样本类型      
  • 物种:书蝎(Neobisium sp.)    
  • 目标:肌肉系统三维结构可视化  Courtesy of Elisabeth Lipke and Dr. Peter Michalik, University of Greifswald, Germany.                
推荐标准化实验流程 (基于Leica EM CPD300)     
1、样本装载      
  • 使用微孔样本罐,置于“滤片与多孔罐支架”中。   
2、固定与脱水      
  • 70% 乙醇中固定,过夜    
  •      乙醇梯度脱水:
  1. 80% 乙醇,10分钟
  2. ✫ 90% 乙醇,10分钟
  3. ✫ 96% 乙醇,10分钟
  4. ✫ 100% 乙醇,2次,每次10分钟   
3、染色      
  • 使用1% 碘乙醇溶液(溶于100%乙醇)过夜染色    
  • 100% 乙醇冲洗2次,每次10分钟   
4、临界点干燥      
  • 使用Leica EM CPD300全自动程序处理     
5、扫描      
  • 干燥样本粘附于样品台上    
  • 使用X射线显微CT系统扫描       
案例二:苍蝇脑部神经结构显微CT成像方法                     
样本类型      
物种:绿头苍蝇(Lucilia caesar)    
目标:脑部神经解剖结构三维重建 Courtesy of Elisabeth Lipke and Dr. Peter Michalik, University of Greifswald, Germany.               

推荐标准化实验流程 (基于Leica EM CPD300)     
1、样本装载      
  • 样本单独放置于“节肢动物支架”的腔室中。   
2、固定与脱水      
  • Bouin固定液过夜固定    
  • 0.1 M磷酸缓冲液(含1.8%蔗糖,pH 7.2)冲洗3次,每次10分钟    
  • 乙醇梯度脱水:
  1. ✫ 60%、70%、80%、90%、96%、100%乙醇,每步10分钟
  2. ✫ 100%乙醇重复2次   
3、染色      
  • 1% 碘乙醇溶液过夜染色    
  • 100% 乙醇冲洗2次,每次10分钟   
4、临界点干燥      
  • 使用Leica EM CPD300全自动程序处理     
5、扫描      
  • 干燥样本粘附于样品台上    
  • 使用X射线显微CT系统进行高分辨率扫描       
案例三:红血虫幼虫器官系统显微CT成像方法                     
样本类型
      
  • 物种:摇蚊幼虫(红血虫)    
  • 目标:幼虫内部器官系统三维重建 Courtesy of Elisabeth Lipke and Dr. Peter Michalik, University of Greifswald, Germany.  推荐标准化实验流程 (基于Leica EM CPD300)     
1、样本装载      
  • 样本单独放置于“节肢动物支架”腔室中。   
2、固定与脱水      
  • 2.5% 戊二醛(溶于0.1 M磷酸缓冲液)过夜固定    
  • 0.1 M磷酸缓冲液(含1.8%蔗糖,pH 7.2)冲洗3次,每次10分钟    
  • 乙醇梯度脱水:
  1. ✫ 60%、70%、80%、90%、96%、100%乙醇,每步10分钟
  2. ✫ 100%乙醇重复2次   
3、染色      
  • 1% 碘乙醇溶液过夜染色    
  • 100% 乙醇冲洗2次,每次10分钟   
4、临界点干燥      
  •  使用Leica EM CPD300全自动程序处理   
5、扫描      
  • 干燥样本粘附于样品台上    
  • 使用X射线显微CT系统扫描    
技术总结        
以上三种方法均采用:
  
  • 标准化乙醇梯度脱水    
  • 碘乙醇染色增强对比    
  • Leica EM CPD300全自动干燥    
  • 显微CT系统扫描   
流程可根据样本硬度、大小与结构复杂度进行微调,适用于绝大多数昆虫及软体生物样本的显微CT前处理。    
仪器推荐:Leica EM CPD300        
全自动操作,温控精准,样本放进去就不用管了,简直是实验室的“干燥神器”!
   
相关产品     
EM CPD300临界点干燥仪
公司简介

全国免费销售咨询热线400-630-7761

公司官网https://www.leica-microsystems.com.cn/

 

徕卡显微系统(Leica Microsystems)是德国著名的光学制造企业。具有175年显微镜制造历史,现主要生产显微镜, 用户遍布世界各地。早期的“Leitz”显微镜和照相机深受用户爱戴, 到1990年徕卡全部产品统一改为“Leica”商标。徕卡公司是集显微镜、图像采集产品、图像分析软件三位一体的显微镜生产企业。

公历史及荣誉产品

1847年  成立光学研究所 
1849年  生产出第一台工业用显微镜 
1872年  发明并生产出第一台偏光显微镜 
1876年  生产出第一台荧光显微镜 
1881年  生产出第一台商用扫描电镜 
1887年  生产出第10,000台 
1907年  生产出第100,000台 
1911年  世界上第一台135照相机 
1921年  第一台光学经纬仪 
1996年  第一台立体荧光组合 
2003年 美国宇航局将徕卡的全自动显微镜随卫星送入太空,实现地面遥控 

 

2005年

推出创新的激光显微切割系统:卓越的宽带共聚焦系统。内置活细胞工作站:

 

2006年

组织病理学网络解决方案:徕卡显微系统公司第三次获得“Innovationspreis”(德国商业创新奖):

 

2007年

徕卡 TCS STED 光学显微镜的超分辨率显微技术超越了极限。 徕卡显微系统公司新成立生物系统部门:推出电子显微镜样本制备的三种新产品

 

2008年

徕卡显微系统公司成为总部设于德国海德堡的欧洲分子生物学实验室 (EMBL) 高级培训中心的创始合作伙伴。
徕卡 TCS SP5 X 超连续谱共聚焦显微镜荣获2008年度《科学家》杂志十大创新奖。
徕卡显微系统公司凭借 FusionOptics 融合光学技术赢得 PRODEX 奖项,该技术能够形成高分辨率、更大景深、3D效果更佳的图像。

推出让神经外科医生看得更清楚、更详细的徕卡 M720 OH5 小巧的神经外科显微镜,

 

2009年

新一代光学显微镜取得独家许可证:

Max Planck Innovation 为徕卡显微系统的全新 GSDIM(紧随基态淬灭显微技术的单分子返回)超分辨率技术颁发独家许可证。

 

2010年

远程医疗服务概念奖:

徕卡显微系统公司在年度互联世界大会上获得 M2M 价值链金奖,Axeda Corporation 被誉为徕卡获得此奖项的一大助力。

Kavo Dental 和徕卡显微系统在牙科显微镜领域开展合作。

Frost & Sullivan 公司颁发组织诊断奖:

徕卡生物系统公司获得研究和咨询公司 Frost & Sullivan 颁发的北美组织诊断产品战略奖。

 

2011年

学习、分享、贡献。 科学实验室 (Science Lab) 正式上线:

徕卡生物系统(努斯洛赫)公司荣获2011年度卓越制造 (MX) 奖:

徕卡生物系统公司获得2011年度“客户导向”类别的卓越制造奖。

 

2012年

徕卡显微系统公司总部荣获2012年度卓越制造奖:

位于德国韦茨拉尔的徕卡显微系统运营部门由于采用看板管理体系而荣获“物流和运营管理”卓越制造奖。

徕卡 GSD 超分辨率显微镜获得三项大奖:

《R&D》杂志为卓越技术创新颁发的百大科技研发奖、相关的三项“编辑选择奖”之一、美国杂志《今日显微镜》(Microscopy Today) 颁发的2012度十大创新奖。

 

2013年

徕卡 SR GSD 3D 超分辨率显微镜获奖

徕卡生物系统公司和徕卡显微系统公司巩固在巴西的市场地位:

收购合作超过25年的经销商 Aotec,推动公司在拉丁美洲的发展。

 

2014年

超分辨率显微镜之父斯特凡·黑尔 (Stefan Hell) 荣获诺贝尔奖:

斯特凡·黑尔因研制出超分辨率荧光显微镜而荣获诺贝尔化学奖。 他与徕卡显微系统公司合作,将该原理转化为第一款商用 STED 显微镜。

徕卡 TCS SP8 STED 3X 荣获两大奖项:

《科学家》杂志十大创新奖和《R&D》杂志百大科技研发奖均将超分辨率显微镜评定为改变生命科学家工作方式的创新成果之一。

日本宇宙航空研究开发机构的宇航员若田光一 (Koichi Wakata) 使用徕卡 DMI6000 B 研究用倒置显微镜在国际空间站进行了活细胞实验。

 

2015年

首台结合光刺激的高压冷冻仪是一项非常精确的技术

徕卡显微系统公司收购光学相干断层扫描 (OCT) 公司 Bioptigen:

 

2016年

徕卡显微系统公司独家获得了哥伦比亚大学 SCAPE 生命科学应用显微技术许可证,同时独家获得了伦敦帝国理工学院 (Imperial College) 的斜面显微镜 (OPM) 许可证。

徕卡 EZ4 W 教育用体视显微镜获得世界教具联合会 (Worlddidac) 大奖:

新的图像注入技术可引导外科医生进行手术:CaptiView 技术可将来自图像导航手术 (IGS) 软件的图像注入显微镜目镜。

 

2017年

全新 SP8 DIVE 系统的推出,徕卡显微系统公司提供了世界上首个可调光谱解决方案,可实现多色、多光子深层组织成像。

徕卡的 DMi8 S 成像解决方案将速度提高了5倍,并将可视区域扩大了1万倍。为获得超分辨率和纳米显微成像而添加的 Infinity TIRF 模块能够以单分子分辨率同时进行多色成像, 由此开启宽视场成像的新篇章。

 

2018年

LIGHTNING 从以前不可见或不可探测的精细结构和细节中提取有价值的图像信息,将传统共焦范围以内和衍射极限以外的成像能力扩展到120纳米。

SP8 FALCON(快速寿命对比)系统的寿命对比记录速度比以前的解决方案快10倍。 

细胞培养实验室的日常工作实现数字化PAULA(个人自动化实验室助手)有助于加快执行日常细胞培养工作并将结果标准化

快速获取阵列断层扫描的高质量连续切片ARTOS 3D ,标志着超薄切片机切片质量和速度的新水平。

随着 PROvido 多学科显微镜的推出,徕卡显微系统公司在广泛的外科应用中增强了术中成像能力。

 

2019年

实现 3D 生物学相关样本宽视场成像THUNDER 成像系统使用户能够实时清晰地看到生物学相关模型(例如模式生物、组织切片和 3D 细胞培养物)厚样本内部深处的微小细节。

 

2020年

STELLARIS是一个经彻底重新设计的共聚焦显微镜平台,可与所有徕卡模块(包括FLIM、STED、 DLS和CRS)结合使用。

术中光学相干断层扫描(OCT)成像系统EnFocus

 

2021年

Aivia以显微镜中的自动图像分析推动研究工作,强大的人工智能(AI)引导式图像分析与可视化解决方案相结合,助力数据驱动的科学探索。

Cell DIVE超多标组织成像分析整体解决方案是基于抗体标记的超多标平台,适用于癌症研究。

Emspira 3数码显微镜——启发灵感的简单检查方法

该系统荣获2022年红点产品设计大奖, 不仅采用创新的模块化设计,而且提供广泛的配件和照明选项。

 

2022年

Mica——徕卡创新推出的多模态显微成像分析中枢,让所有生命科学研究人员都能理解空间环境

LAS X Coral Cryo:基于插值的三维目标定位,沿着x轴和y轴对切片进行多层扫描(z-stack)。这些标记可在所有相关窗口中交互式移动

具有高精度共聚焦三维目标定位功能的Coral Cryo工作流程解决方案


 

徕卡很自豪能成为丹纳赫的一员:

丹纳赫是全球科学与技术的创新者,我们与丹纳赫在生物技术、诊断和生命科学领域的其他业务共同释放尖端科学和技术的变革潜力,每天改善数十亿人的生活。


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