RNAi载体构建及筛选
实验原理
早期的shRNA载体多采用RNA聚合酶III型启动子介导shRNA的表达,RNA聚合酶III型启动子如鼠源的U6启动子和人源的H1启动子可以在哺乳动物细胞中表达小分子RNA。随着miRNA干扰机制的深入研究,发展出第二代shRNA载体,即采用RNA聚合酶II型启动子CMV表达含侧翼序列的miRNA模拟物。该载体模拟miRNA的加工,表达出来的shRNA进入RISC沉默复合物的效率要比RNA聚合酶III型启动子表达的shRNA高数十倍,抑制效率更好,且可以和EGFP协同表达,方便观察转染效率。
实验流程
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从2008年开始,上海锐赛生物开展生物技术服务已有六年多,多次被客户和业内媒体评为优秀技术服务供应商。
在长期的合作、学习和改进中,锐赛生物已经形成了在细胞和病毒领域的专业优势,长于转化医学整体项目的设计与实验,专注于与各知名三甲医院、高校和科研院所的技术合作。围绕热门的恶性肿瘤与重大疾病方向,锐赛生物为广大医学专家和科研工作者提供整体实验设计、细胞、病毒、分子和检测等方面的技术服务。
公司位于张江高科技园区,由一群海内外从事科学技术研究和生物技术产业化研发的专业人士共同创立。锐赛同时还开发实验室用和医疗类的专利产品,并积极寻求业内合作伙伴,推进技术服务行业的进步与新技术产业化。
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