一文带你简单了解流式细胞术~
流式细胞术(Flow Cytometry,FCM)从字面意义理解,Flow——Fluid、Cyto——Cell、Metry——Measurement,流式细胞术指的就是检测流动细胞的一种技术,能在细胞流动的状态下,快速检测细胞或颗粒物的特异性指标。它是一种在功能水平上对单细胞或其他生物粒子进行定量分析和分选的检测手段,具有速度快、精度高、准确性好等优点,成为当代最先进的细胞定量分析技术。
在一定的压力下,鞘液带着细胞或者微粒通过喷嘴中心进入到流式照射室,在流式照射室的分析点,激光照射细胞并发生散射和折射,发射出散射光,同时被荧光标记的颗粒发射出荧光。散射光和荧光分别被不同的检测器接收,通过光电倍增管将检测到的荧光信号转换成电信号,这些电信号放大后再经过数据化处理输入电脑,供我们进行分析。
流式直方图本质上就是统计直方图,是累积显示细胞量非常大而统计区间又非常小的统计直方图。横坐标代表荧光信号或散射光信号的相对强度,可以是线性或对数坐标;一般是相对细胞数。
散点图十分利于两参数图,而两个参数分别分布在x轴和y轴上,并且细胞计数以密度(点)图或轮廓图的形式显示,可显示其频率分布,同时也可以不同的颜色以标识给定位置的单元格密度。当用象限标记将散点图分为四个部分时,在直方图理解的基础上,可知右上象限表示荧光标记均为阳性或双阳性细胞,而左下象限则恰恰是显示两个标记均为负的细胞,左上象限和右下象限则分别代表只对y轴参数或x轴参数标记为正的细胞。
流式等高线图的意义和实际应用与流式散点图较为相似,可以看作是流式散点图的一个变体。相比之下,流式散点图更为直观,所以应用也更为广泛。当然,流式等高线图也有其自身的优点,它较能直观地体现细胞群的集中点,等密度环线的中央区域代表一个细胞群的集中点,一般代表一个细胞群,所以在某些情况下,流式等高线图比流式散点图更能直观地体现细胞的分群。
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