RNAi (RNAinterference, RNA干扰)技术，即将与内源 mRNA 编码区同源的小片段（19 －23bp）外源双链 RNA（double s`tranded RNA ）导入细胞中，通过一系列细胞内反应引发细胞中相应 mRNA 的降解，从而导致特定基因表达沉默的一种技术。RNAi的作用提供了一种经济、快捷、高效的抑制特异基因表达的技术手段，有助于研究该基因在生物模型系统中的作用，是研究基因功能的重要工具，并且逐步成为病毒性疾病、遗传性疾病以及肿瘤等的基因治疗研究的一种手段。
基本原理示意图

siRNA载体构建服务程序
本公司提供siRNA 载体的构建服务，siRNA 载体可以在细胞内直接转录出 shRNA ，其干扰效果等同于siRNA ，而且能够解决 siRNA干扰时间短的缺点。您只需提供需干扰基因的详细信息，包括基因的 mRNA 序列，Genbank Accession No. 和所属物种，本公司负责设计3条针对目的mRNA的siRNA 靶序列，在短时间内构建三个可用于目的mRNA干扰实验的siRNA 载体。可以为您节省大量的时间与精力。此方法是多种siRNA制备方法中唯一可以进行长期基因沉默研究的方法。

siRNA载体构建服务程序：
1. siRNA表达载体的选用：
本公司选用的siRNA 表达载体含新霉素抗性基因和GFP绿色萤光标记，可以建立稳定表达系，同时可以实时监测载体在细胞中的转染效率。载体中还含有Amp抗性基因，可以无限扩增。
2. 设计siRNA靶序列
A 、根据目的mRNA序列，设计3条RNA干扰靶序列，靶序列一般为19 － 21nt 长。
B 、对于每条选定的siRNA 靶序列，设计 siRNA 正义链和反义链，以 loop(9nt) 相连，称为 shRNA（short hairpin RNA）。
C、阴性对照的设立.
3. 合成模板：
合成每条编码 shRNA的DNA 模板的两条单链，退火 DNA 单链得到 shRNA 的 DNA 双链模板。模板链后面接有RNA PolyIII聚合酶转录中止位点，同时两端分别设计 BamHI 和 HindIII 酶切位点，可以克隆到 siRNA 载体多克隆位点的 BamHI 和 HindIII 酶切位点之间。
4. siRNA 空载体用BamHI和HindIII双酶切后，1 ％琼脂糖凝胶电泳，回收线性载体。
5. 连接与转化：
把退火的DNA模板双链连接到线性载体中。采用T4连接酶，插入片断与载体的摩尔比约为 3 ： 1 。连接产物转化DH5α大肠杆菌，在LB Amp培养基上涂板，37 ℃培养过夜。
6. PCR 鉴定
7. 测序鉴定
8.柱抽提阳性克隆载体并定量。

至善健康医学研究院成立于2005年，专业从事胚胎干细胞、分子生物医学及基因工程动物模型敲除的技术研发、大鼠小鼠Morris水迷宫实验外包服务及大鼠小鼠海马侧脑室aav病毒立体定位注射动物实验服务，视网膜玻璃体定位注射实验服务，分子生物医学科研动物病理生理实验外包动物病理医学科研实验外包技术服务，提供老年老龄sd大鼠及c57老年小鼠，设有干细胞生物学、分子生物学和基因工程动物表型分析实验室，可提供用于科学研究和药物研发的各类动物胚胎干细胞和人胚胎干细胞、成体细胞、基因工程干细胞株、脐带间充质干细胞、SD大鼠骨髓间充质干细胞、小鼠骨髓间充质干细胞及相关培养基，同时提供基因敲除小鼠订购、转基因小鼠订购、基因沉默小鼠和转基因小鼠等基因工程动物模型的构建和基于干细胞的药物研发服务。

    随业务范围的扩大，公司面向海内外征集细胞生物学与分子生物学相关产品的合作伙伴。 经营范围：基因敲除小鼠模型建立、销售基因敲除小鼠、销售转基因小鼠、显微注射、基因打靶、条件性敲除、定点敲除转基因载体、基因沉默（siRNA）和质粒DNA表达载体构建实验技术服务；胚胎干细胞培养和细胞生物学实验服务；基因敲除小鼠、基因沉默小鼠和转基因小鼠构建；各种细胞株（人胚胎干细胞、小鼠胚胎干细胞、iPS细胞、成体干细胞和肿瘤细胞）；细胞培养基；质粒载体；超纯水、双蒸水、去离子水、医用蒸馏水销售小鼠基因敲除小鼠服务价格，RNA干扰载体构建技术服务，人胚胎干细胞、小鼠胚胎干细胞培养技术服务，基因沉默小鼠构建技术服务，siRNA载体构建技术服务，基因沉默构建技术服务，载体构建技术服务，RNAi表达载体构建服务，转基因小鼠构建，细胞生物学技术服务，分子生物学技术服务， pcDNA载体构建实验服务，siRNA质粒载体构建服务，细胞转染技术服务。                    

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      公司秉承“科学至上，锐意进取”的经营理念，坚持“客户第一”的原则为广大客户提供优质的服务。欢迎惠顾！