分子与细胞

高灵敏度基因突变检测---HRM技术检测

基本信息
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高灵敏度基因突变检测---HRM技术检测
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2468
更新日期:
2010-09-30
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服务详情

 

基因突变-HRM检测服务

 

基因突变是指由于DNA碱基对的置换、增添或缺失而引起的基因结构的变化。基因突变在生物界中是普遍存在的,它是生物变异的主要原因,是生物进化的主要因素。但大多数基因突变对生物体是有害的,如果发生基因突变,就有可能破坏这种协调关系。绝大多数的人类遗传病如人的色肓、糖尿病、白化病等遗传病,都是突变性状,是由基因突变造成的,这些病对人类健康构成了严重威胁。

目前突变研究手段比较

大致有三大类

一类是以荧光共振能量传递为基础的检测方法,简单的说就是以定量PCR为基础的,比如Taqman探针法、分子信标(Molecular beacon)和FRET(HybProbe),应用这一类方法时需要对突变位点背景很清楚,针对特定的突变位点设计并合成序列/位点特异性探针。

第二类是以分子杂交技术为基础的检测方法,如寡核苷酸连接分析(OLA)和动态等位基因特异性杂交(DASH),这几种方法也均涉及到序列特异性探针。

第三类是基于PCR技术与其它方法相结合的检测方法,如变性-高效液相色谱(DHPLC)、SSCP(单链构象多态性)、DGGE(变性梯度凝胶电泳)、测序、Pyrosequencing和Ecotilling、芯片等技术,这几种方法在PCR扩增的基础上对产物过柱分析,或电泳分析,无需合成序列特异性探针,不受位点的局限,可对已知和未知突变进行操作。但DHPLC仪器昂贵,使用成本高,SSCP和DGGE通量相对较小、操作繁琐、成本高、速度慢;测序是所有突变检测的金标准,但测序的成本相当可观;Pyrosequencing技术的突出优势在于Pooling,适用于大规模的等位基因频率分析,但需要特殊的仪器,硬件成本高;Ecotilling是一种在目标区段内筛查SNP的高通量、低成本的方法,但由于需要合成特定的红外引物,所以在样本量少、研究区段多的情况下就无法体现其优势。

为真公司创新使用基于罗氏LightCycler 480的基因突变-HRM检测技术。其特点为:高通量、简单、快速、省钱、高灵敏度;闭管检测,避免污染造成的假阳性;灵敏度和精确度达到近100%;HRM分析和PCR是在同时进行,减少了额外仪器,无疑成本更低,特异性和精确度更好。

突变-HRM检测技术原理:

在一定的温度范围内将PCR扩增的产物进行变性,期间实时检测体系内荧光信号。荧光值随着温度变化,可绘制溶解曲线。每一段DNA都有其独特的序列,因而也就有了独特的熔解曲线形状,如同DNA指纹图谱一样,具有很高的特异性、稳定性和重复性。根据曲线准确区分野生型和突变型基因。

我们的服务:

l  免费的项目咨询

l  客户提供样本DNA的分离、纯化(可有为真公司代为提取)

l  根据客户提供相关信息进行引物设计、方案设计

l  处理DNA并运用HRM技术获得特异溶解曲线

l  结果分析,出具实验报告,为临床用药提供依据

苏州为真生物在基因突变分析和研究方面积累了丰富的经验,拥有开展突变研究的先进仪器设备,具有自己独到的研究策略和方法,能有效挖掘资源,能为你高效快速的进行突变位点检测。

 

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公司简介

苏州为真生物医药有限公司
Suzhou MicroDiag Biomedicine Co., Ltd.


苏州为真生物医药有限公司(Suzhou MicroDiag Biomed Co., Ltd)/苏州肿瘤分子诊断工程技术研究中心是一家拥有一支学科结构合理、掌握国际领先技术、富有创新精神的专业技术人才团队的医药类高科技研发型企业,立足于开发自主知识产权的癌症个体化医疗诊断试剂盒,致力于成为“个性化医疗时代” 的检测专家!公司2008年9月注册成立,资金1010万,由国内著名风投机构中新创业投资有限公司投资,正进行千万美元级别的I期融资。

公司坐落于国家级高新技术开发区——苏州工业园(China-Singapore Suzhou Industrial Park)生物纳米科技园(bioBay)。目前公司/中心已建立标准化实验室、III类GMP标准分子诊断试剂盒生产车间和II类医疗器械生产厂房,总面积超过3000m2;现有高级研究员5名,归国人员2名,博士8名,硕士十余名,员工均本科以上学历;配备LightCyclerTM 480 PCR仪、Nano1000定量仪、Bio-Rad蛋白电泳仪、DAKO自动染色成像仪、BD FACSCalibur流式细胞仪等现代化分子实验仪器。2010年4月中心/公司获江苏省药监局颁发的III类分子诊断试剂盒和II类医疗器械生产许可证。

公司已获批准“苏州肿瘤分子诊断工程技术研究中心”,已申报建设“江苏省肿瘤分子诊断工程技术研究中心”,公司是“苏州市内资研发机构”, “江苏省民营高科技企业”。近期,中心/公司作为核心成员参加由中国医学科学院和苏州工业园区联合组建的“苏州创新生物医药研究中心”,承担其中“肿瘤分子诊断平台”建设和运行。

苏州为真以领先的癌症检测国际专利技术MiDTM为依托,正引领癌症筛查和诊断全面进入“分子”时代。MiDTM突破了从肿瘤细胞死亡后DNA片段中检测微量突变的关键技术,第一次实现了血清或血浆等非细胞体系的基因突变的高灵敏度集成式检测,已形成三大系列检测产品:“个性化用药指导检测试剂盒”、“早期癌症筛查和诊断试剂盒”、“癌症筛查套餐和预后、复发监控的产品”,形成国内最全面最专业的个性化医疗检测方案,实现个性化用药指导、健康筛查、超早期预警、早期诊断、预后指导和复发监控等。已获5项国家发明专利,申请15项新发明专利,包括7项国际发明专利。2009年获省部级课题经费达到128万余元,2010年预计研究经费超过400万左右。


为真人始终坚持“为真求实,开拓创新”的价值理念,以实现“更好的诊断(Better Diagnosis),更好的健康(Better Health)”是自己不懈的使命。
 


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