RT-PCR及质粒载体构建技术服务
具体操作:
一、RT-PCR扩增目的基因:
1、提取目的细胞或组织的总RNA,并将其反转录成cDNA;
2、采用普通PCR扩增得到目的基因(对于片段较长或在细胞中表达量较低的基因,采用巢式PCR进行扩增);
3、将目的基因克隆到T载体上,并进行测序鉴定(如客户需要克隆到其他载体上,需要提供载体,可直接将目的基因克隆到相应载体上);
二、半定量RT-PCR(一般用于目的基因表达改变的检测):
1、提取目的细胞或组织的总RNA,并将其反转录成cDNA;
2、采用普通PCR扩增内参(b-actin或GAPDH),调整扩增循环数,使其处于对数扩增期;调整内参,使其保持一致;
3、普通PCR扩增目的基因,并通过图像分析软件分析目的基因与内参表达量的比例;
4、统计分析;
服务价格:
询价。
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详细地址:
北京市丰台区青塔西路
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