酶联免疫吸附剂测定(ELISA)
酶联免疫吸附剂测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)的基本原理是:①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在测定时,把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开,最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化变为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据颜色反应的深浅刊物定性或定量分析。由于酶的催化频率很高,故可极大地地放大反应效果,从而使测定方法达到很高的敏感度。
本公司还提供各种进口elisa kit(R&D公司的原装
和分装产品),具有多年实验经验,对试剂的选择有丰
富的经验。
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方法类型:
ELISA 可用于测定抗原,也可用于测定抗体。在这种测定方法中有 3 种必要的试剂:(1)固相的抗原或抗体;(2)酶标记的抗原或抗体;(3)酶作用的底物。
根据试剂的来源和标本的性状以及检测的具备条件,可设计出各种不同类型的检测方法:(1)双抗体夹心法;(2)间接法测抗体;(3)竞争法(4)捕获法测 IgM 抗体;(5)应用亲和素和生物素的 ELISA。
佰而林提供492或490nm、450nm、405nm、585nm的各种波长的ELISA检测,检测样本包括血清、血浆、细胞培养上清和组织匀浆等,灵敏度极高,报告真实可靠。
佰而林样品要求:
在收集标本前都必须有一个完整的计划,必须清楚要检测的成份是否足够稳定。我们提倡新鲜标本尽早检测,对收集后当天就进行检测的标本,及时储存在4℃备用,如有特殊原因需要周期收集标本,请造模取材后,将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。因冰室与室温存在一定温差,蛋白极易降解,直接影响实验质量,所以避免反复冻融。
(1)血清样本:室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(2)血浆样本:应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(3)尿液样本:用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
(4)细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(5)组织样本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
佰而林生物科技有限公司,是一家由归国留学专家创办的专注于生命科学领域的高科技企业。公司提供覆盖分子生物学、细胞生物学、免疫学等领域的实验室产品、生物技术服务以及专业生物统计分析等咨询服务,致力于为客户在生命领域探索创造有利条件。经过三年的高速发展,已经在全国重点城市都成立了办事处,与当地科研院校保持着广泛的合作。
佰而林提供覆盖临床医学、分子生物学、细胞生物学、免疫学、病理学等生命科学领域的生物技术服务,包括荧光定量PCR、免疫印迹、ELISA、流式细胞术、免疫组化、动物造模等。公司技术人员均具备本科以上专业背景,为客户提供强大的技术保障。
佰而林广州实验中心拥有强大的技术团队,公司员工研究生以上学历占比30%,本科以上学历占比100%。公司配备先进科研仪器设备如:AKTA蛋白纯化系统、流式细胞仪、激光共聚焦显微镜、液-质联用(LC-MS)系统、luminex200、制备兼分析型高效液相色谱仪、酶联斑点图像自动分析仪、实时荧光定量PCR仪等。
佰而林的服务宗旨是提升客户的研发技术质量,降低客户的研发总体成本,缩短客户的研发整体周期。让我们专业的技术团队,为您的成功,助一臂之力。
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