基于分子克隆技术平台，我们提供的服务包括任何DNA片段的克隆，包括任何DNA调控元件的克隆及ShRNA基因干涉质粒、基因表达、基因打靶等质粒的构建。 表达系统包括E. coli、昆虫及哺乳类细胞。

一. 多ShRNA干涉construct的构建

      将多个ShRNA同时克隆到一个载体上，可作用于同一个基因，其沉默效率高达90%以上，甚至接近100%。该系统免除了建立常规ShRNA基因干涉系统的最佳序列摸索过程，可真正替代传统的基因沉默技术和基因敲除技术。

二. 哺乳类细胞附加体非整合表达系统的构建

      其附加体可以象质粒一样在哺乳类细胞内复制形成多拷贝但又不整合到细胞的基因组中，因此既能实现基因的高表达又免除了基因整合所带来的副作用。另一方面，附加体载体的DNA装载量异常之大，几乎可容纳任何大小的基因。因此，我们建立的附加体非整合表达系统免除了常规基因修饰、基因表达和基因治疗过程中合适载体筛选的繁琐过程。

说明：

1. 一般性DNA 克隆服务

1) 以动物组织或细胞为模板，提取获得gDNA或者cDNA，从中扩增基因、启动子等功能元件。可应客户要求，将基因片段或者各功能元件片段亚克隆至各载体。
2) 由客户提供已带有欲克隆基因片段或各功能元件片段的载体，通过PCR从中扩增基因或功能元件，并将之亚克隆至另一载体。

实验步骤及周期：

1) 从动物组织或细胞中获取gDNA或者cDNA，1～2个工作日。(若由客户提供已带有欲克隆基因片段或各功能元件片段的载体,此步可免)
2) PCR扩增相关基因或功能元件，连接至T载体测序。8～9个工作日。
3) 将测序后符合要求的基因或功能元件片段亚克隆至目的载体。5个工作日。

2. DNA亚克隆服务（同一般性DNA 克隆服务）

服务内容：

1) 某基因片段或某功能元件片段在载体间的亚克隆转移。
2) 多基因融合表达载体或多基因多表达载体的构建。

3. 已有基因或功能元件的定点突变（某点或某段区域均可）

服务内容：

双链DNA（启动子/基因/特定序列）中任何位点的定点突变。 


4. 基因启动子元件的调取和克隆

若客户提供基因组DNA，按基因调取和克隆价格的2/3计算。
若客户不提供基因组DNA，每次加收500元的DNA提取费用。 

5. 特殊DNA construct的构建

若客户提供载体，则按以上一般DNA克隆的价格收费。
若需我方购买它方公司载体，则载体购买费由客户承担。
若用我方构建的载体，每个载体的每次使用在一般克隆基础上加收载体构建的费用。 

6. 多ShRNA干涉construct的构建

特点：将4个ShRNA同时克隆到一个载体上，若作用于同一个基因，其沉默效率高达90%以上，甚至接近100%。

客户须知：

1) 调取基因所需的原材料如由客户提供，客户应保证所提供原材料即基因模板的正确性。如基因模板本身具有移码突变或其它无义碱基突变，由此造成的实验时间延误、重复实验费用或其它经济损失均由客户承担。（从客户提供的基因模板调取基因，如重复两次，均在相同位置出现相同突变，则认为是模板问题。）

2) 如目的基因所在的载体由客户提供，则客户需要提供足量高纯度的质粒（>5ug，电泳图清晰，达酶切测序要求）及本公司鉴定工作所需的材料。

3) 本公司在收到客户提供的材料后会在第二个工作日起开始鉴定工作，鉴定的时间不包括在实验周期内。

4) 客户应对所提供的材料及信息负责，如因客户提供的材料及信息不准确而引起的实验延误或经济损失由客户承担。

服务承诺：

1) 调取的基因或功能元件片段无移码突变（原材料由客户提供的不在此例），无义碱基突变控制在1%以内。

2) 完整的实验报告、测序报告。 

百恩维生物科技有限公司（BioWit Technologies），是一家专业从事生物科技前沿技术研发的高新技术企业。为国内外众多药厂和科研机构提供病毒包装，蛋白表达，载体构建，干细胞培养基，转染试剂、细胞因子等产品及技术服务。公司专家团队曾在国内外知名学府和国际一流制药公司从事研发多年。