实验技术简介：TUNEL 技术, 即脱氧核苷酸末端转移酶( Term inal2deoxynucleo t idyl t ran sferase, TdT )介导的x2dU TP 缺口末端标记(TdT 2m ediatedx2dU TP n ick end labeling, TUN EL ) 技术是目前原位检测细胞凋亡最敏感、快速、特异的新方法, 已广泛用于生物、医学研究领域。TdT-mediated dUTP-biotin nick end labeling (TUNEL)是一种用来检测细胞凋亡(apoptosis)的分析方法.细胞凋亡有一项重要的特征为细胞内的DNA会碎裂成片段(DNA fragmentation),TUNEL可以有效的去探测DNA片段的产生,所以可以传达细胞凋亡的讯息.TdT为terminal deoxynucleotidyl transferase,此种酵素可以在没有DNA模板的情形下,连结核甘酸到DNA的3'-OH处.1992年,以色列科学家Gavrieli等人将TdT引为为标定DNA片段的一个酵素,自此衍生出TUNEL此项技术.TUNEL的好处是可以在细胞凋亡发生的早期,即可侦测到DNA片段的产生,并且可以直接使用在组织切片上,观察细胞凋亡发生的位置.所以TUNEL目前为广泛接受与使用的一种细胞凋亡的分析方法.

实验操作流程：
1．石蜡切片，常规脱蜡至水; 石蜡切片4um贴在涂有切片粘合剂的载玻片上，58。C烤24h，常规脱蜡至水，二甲苯Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ 各10分钟，无水乙醇，95%，85%，75%乙醇，各2分钟，水洗2分钟。
2．0.3%H2O2作用  30min,室温，PBS洗3min×3次；
3．Proteinase K 20ug/ml  37℃ 20min
4．PBS洗3min×3次；
5．0.1%Triton×100 PBS洗3min×3次；
6．PBS洗3min×3次；
7．TUNEL混合液---1ml Tunel缓冲液中加入10ul  b-11-DUTP, 10ul  TDT, 37C  1h,室温1h
8．PBS洗3min×3次；
9．Streptavidin-HRP  1:400  37C  30min
10．PBS洗3min×3次；
11．0.04%DAB+0.03%H2O2显色10min，流水洗
12．苏木精衬染1min，盐酸乙醇分化，水洗
13．常规树脂封片

实验具体收费、标本的收集、实验试剂的定购等事宜，请联系嘉美生物。
实验预约热线：400-698-4168   010-58464308   010-58464306
实验预约邮箱：jiamei_bj@126.com   info@

嘉美生物，是一家专注于生命科学领域的高科技企业。公司成立于2004年，自成立以来，公司秉承“关注生物技术，服务生命科学”的理念，致力于服务广大科研工作者，提供优质产品及服务。让生命科学研究，“专业化，简单化，快速化”是嘉美人不懈追求的目标。目前，公司独家经销美国ABGAB，GTS等公司的产品；全国总经销的品牌有：Abnova，ABR，Ebioscience，Neomarkers/Lbvision，Santa Cruz，Biovision，MP(美国分子探针公司)，Assay Design，Stressgen，Novus，Genetex等公司；经销代理：ABR，Alexis，Abgent，Amaxa，Bender，Chemicon，Linco，Cayman，Merck，Peprotech，KPL，SBA，Serotec，Upstate，Sigma，CST，R&D，Zymed，Biosource，Caltag，BioVendor，EPITOMICS，DSL，Finnzymes，Invivogen，Vector，GenWay，Roche，LifeSpan，Rockland，Mebtech，BD，Invitrogen，Bethyl，Jackson，Vector，Pierce，Biomol等公司产品。嘉美的产品和服务涵盖生命科学研究技术的诸多方面,提供覆盖分子生物学、细胞生物学、免疫学等领域的实验室产品、生物技术服务以及专业生物统计分析等咨询服务。面对日益激烈的市场竞争，公司将通过建立一支拥有专业、可靠、高效的队伍，努力在产品的售前、售中和售后都提供专业的技术服务，确保我们的用户和合作伙伴无后顾之忧。嘉美生物正朝着多元化，集团化发展，将通过建立一支拥有专业、可靠、高效的队伍来确立嘉美生物在全球生物产业界的地位。希望我们的专业、真诚和努力能赢得您的信赖！希望我们能携手走得更稳、更快、更远！