RNA干扰实验
逆转录RT-PCR
步骤一 确定检测基因,准备检测组织或细胞,设计并合成引物。
步骤二 总RNA提取,纯度检测。
步骤三 逆转录-PCR实验,琼脂糖凝胶电泳。
步骤四 照相采图,测定条带灰度值或吸光度值。
RNA干扰(RNA interfering,RNAi)现象是指由与靶基因序列同源的双链RNA(DsRNA)引发的基因转录后的沉默过程,小干扰RNA特异性介导相同序列的mRNA降解,阻断相应基因表达。为您提供的RAN干扰技术包括化学合成小RNA片段(SiRNA)和构建载体RNA(SnRNA)两种形式,客户只需提供干预基因名称或基因序列ID,我们免费设计合适的干预位点,保证至少有一对小RNA有效抑制目的基因表达,抑制效率不低于70%。
RNA干扰流程
步骤一 确定干扰基因,设计并合成合适的小干扰RNA(片段型或载体型小干扰RNA)。
步骤二 预转染实验,进行细胞培养,摸索转染条件、时间并进行必要的检测(WB,PCR等),确定干预效果最佳的一对小RNA。
步骤三 正式实验,设置合理实验分组,进行瞬时或稳定转染。
步骤四 转染后检测,根据实验要求选择细胞生物学检测、蛋白检测、分子生物学检测等。以研究小干扰RNA对于细胞、蛋白或基因功能的影响。
RNA干扰检测
细胞检测 细胞增殖毒性MTT 细胞凋亡 细胞周期 细胞迁移 细胞侵袭
蛋白检测 免疫印迹WB 免疫细胞化学ICC 免疫荧光IF
流式细胞术FCM 酶联免疫ELSIA
分子生物检测 RT-PCR 实时荧光定量PCR 甲基化特异性PCR(MSP)
生化检测 酶类检测 脂类检测 糖类检测
北京泰诺达科贸有限公司是一家以提供科技服务、生物实验外包、提供实验室设备及耗材的新科技型企业,依托清华大学、中国农业大学、中国军科院、中国医学科学院药物所等科研机构联合开发新技术。北京泰诺达科贸有限公司不仅为大专院校、科研机构、企事业单位提供优质的科研仪器,并且提供一流的技术咨询和技术服务。