SMART cDNA文库构建
SMART cDNA文库
以总RNA为模板,用SMART方法在体外反转录成cDNA,与适当质粒载体连接后转化受体菌,则每个细菌含有一段cDNA,并能繁殖扩增,这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该组织或细胞的cDNA文库。cDNA文库中获得的是已经经过剪接、去除了内含子的cDNA。
文库特点:
1、材料用量少,只需1?g总RNA;
2、采用Clonetech SMART专利技术,技术成熟,全长比例高。
SMART cDNA文库构建材料要求:
组织(100~200mg)、细胞(>106)或总RNA (>1?g ),请务必保持样品新鲜,RNA 无任何降解,植物材料应避免过老的组织,尽量用柔嫩部位,以确保文库质量。同时请尽量提供物种基因组背景资料信息,如:基因组大小,基因平均长度,预计表达的基因数量等等。
SMART cDNA文库构建提供结果:
1、产物电泳图谱;
2、文库连接液,保存在-20℃;
3、文库评价数据,包括库容量,插入片段平均长度,重组效率, cDNA完整性评价等;
4、包含实验流程,材料,方法等在内的完整的实验报告。
SMART cDNA文库构建服务周期:得到合格的总RNA后25个工作日内。
作为国内cDNA文库构建的主流服务供应商,在长期稳定的实验服务过程中积累了丰富的经验,我们已经成功构建的cDNA文库涉及如下材料:
动物:人、大鼠、小鼠、猪、牛、蟹、虾、鲫鱼、多宝鱼、壁虎、昆虫、线虫、原生动物等。涉及组织部位包括肾脏、脑、腮、脾、肠、心脏、肝脏等以及各种培养的细胞。
植物:拟南芥、水稻、棉花、小麦、油菜、地瓜、银杏、茶、槟榔、椰子、木薯、百合、土豆、紫菜、烟草等。涉及组织部位包括整株小苗,不同发育时期的种子、胚、胚乳,不同发育时期的花、雄蕊、雌蕊,不同发育时期的顶端分生组织,叶、根尖、穗等。
微生物:多种细菌、动物病毒等。
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