微生物基因组从头测序
推荐平台:Roche 454 FLX+ 数据为主导,结合Illumina MiSeq和ABI 3730XL数据。
1.原始数据整理、过滤及质量评估
2.基因组序列拼装与分析:
基因组序列拼装
基因组拼装效果评估 (contig N50、scaffold N50、genome size and GC% )
缺口填补(gap finish)
比较基因组分析(基因组进化树分析、SNPs、共线性以及重复片段分析)
绘制基因组图谱
蛋白编码基因预测
非编码 RNA预测
CRISPRs预测
蛋白编码基因的功能注释
蛋白编码基因的KOG和 GO 注释
蛋白编码基因的代谢途径注释(KEGG pathway)
4.根据客户需求进行个性化分析
1、 细菌:浓度≥200 ng/μl,总量≥50 μg;OD260/280值介于1.8-2.0之间的细菌基因组DNA,并确保电泳检测无明显RNA条带,基因组条带清晰、完整,主带应在100 kb以上,DNA无降解,无污染。
2、 真菌:样品浓度≥200 ng/μl,总量≥50 μg,OD值介于1.8-2.0之间的DNA,样品浓度越高越好。真菌的De novo 测序获得精细图,若基因组大小介于10~45Mb之间,需提供至少100μg的DNA,若基因组大小大于45Mb,则需200 μg的DNA。
3、 样品保存期间切忌反复冻融。
4、 送样管务必标清样品编号,管口使用Parafilm 膜密封。
5、 提供DNA电泳检测照片,用自封袋密封后随样品一起送样。
Roche 454 FLX+ System作为二代测序系统中读长最长的测序系统(最长可达1000 bp),是进行基因组de novo测序的最佳选择。同时配合双端测序试剂盒,进行3 kb、8 kb和20 kb三种不同插入长度的双端测序,使得在拼接中能够跳过大范围的重复区,极大地优化了全基因组de novo拼接的结果。再结合Illumina和ABI 3730测序平台,将为您提供高质量的微生物基因组de novo测序服务。
派森诺生物拥有多个先进的测序平台,经验丰富的技术人员及成熟的数据处理和信息分析系统,能够根据合作伙伴的具体需求,设计最佳实验方案,第一时间提供专业、高效的全基因组de novo测序服务。
案例
项目背景:基因组较大,GC含量高
研究目的:进行全基因组测序,了解基因组的全貌
上海派森诺生物科技有限公司(以下简称“派森诺生物”)成立于2011年4月,公司总部位于上海市徐汇区,是在已有DNA一代测序合成平台基础上,以上海交通大学等海内外高等学校和科研院所的专家教授团队为技术依托,吸纳了多名基因组学和生物信息学高级专业技术人员加盟组成的高科技生物技术公司。
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上海徐汇区龙吴路777号7号楼3楼
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